[发明专利]盐酸莫西沙星起始原料中基因毒性杂质的分析方法

权利要求书

1.盐酸莫西沙星起始原料中潜在基因毒性杂质的分析方法，其特征在于，所述起始原料为1-环丙基-6,7-二氟-1,4-二氢-8-甲氧基-4-氧代-3-喹啉羧酸乙酯；所述潜在基因毒性杂质选自酰卤类及不饱和酯类化合物；首先采用无水乙醇与杂质2,4,5-三氟-3-甲氧基苯甲酰氯进行衍生化反应生成2,4,5-三氟-3-甲氧基苯甲酸乙酯；其次采用以5%苯基-甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱对衍生物及杂质3-(N,N-二甲基氨基)丙烯酸乙酯进行分离；最后采用质谱检测器进行分析检测；

采用质谱检测器进行分析检测时采用程序升温，起始温度100℃，维持5分钟，以每分钟10℃的速率升温至150℃，维持5分钟，以每分钟20℃的速率升温至300℃，维持5分钟。

2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）采用衍生化法制备供试品溶液：

取盐酸莫西沙星起始原料，精密称定，精密加入衍生试剂无水乙醇，置水浴加热，使无水乙醇与盐酸莫西沙星起始原料中的杂质2,4,5-三氟-3-甲氧基苯甲酰氯反应，生成衍生物2,4,5-三氟-3-甲氧基苯甲酸乙酯，用二氯甲烷稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液；反应过程如下：

（2）对照品溶液的制备：

分别取3-(N,N-二甲基氨基)丙烯酸乙酯对照品、2,4,5-三氟-3-甲氧基苯甲酰氯对照品，精密称定，加无水乙醇， 水浴加热，用二氯甲烷溶解并定量稀释制，作为对照品溶液；

（3）检测：

分别精密量取供试品溶液和对照品溶液，注入气相色谱仪，在程序升温条件下，对所述杂质及衍生物进行分离，采用质谱检测器进行分析检测；按外标法以峰面积计算供试品溶液中杂质2,4,5-三氟-3-甲氧基苯甲酰氯及3-(N,N-二甲基氨基)丙烯酸乙酯的含量。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤（1）中，衍生化反应温度控制在30℃；衍生化反应时间控制在10分钟。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤（1）中，衍生试剂与盐酸莫西沙星起始原料的体积质量比为5 ml:1 g。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤（3）中，所述气相色谱仪采用5%苯基-甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱，规格为30m×0.25mm×0.25μm。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤（3）中，程序升温的载气为氦气，流速为0.8ml/min～1.2ml/min，分流比为1:5；进样口温度为260℃～300℃，进样体积为1µl。

7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤（3）中，采用质谱检测器进行分析检测时，采用电子轰击离子化离子源，选择离子监测模式，根据杂质3-(N,N-二甲基氨基)丙烯酸乙酯及衍生物2,4,5-三氟-3-甲氧基苯甲酸乙酯的化学结构，选择m/z 143、m/z 234的分子离子进行定量分析。

8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤（3）中，按外标法以峰面积计算供试品溶液中所述潜在基因毒性杂质的含量：

含量= A_i×C_s/A_s/C_i×10⁶

式中：Ai为供试品溶液色谱图中各杂质的峰面积；

As为对照品溶液色谱图中各杂质的峰面积；

Ci为供试品的浓度，mg/ml；

Cs为对照品的浓度，ng/ml。