[发明专利]一种小样品冰冻断面快速成像方法

权利要求书

1.一种小样品冰冻断面快速成像方法，包括以下步骤：

S1：对摄影平台进行搭建；

S2：根据样品尺寸选取合适包埋框，并在包埋框内填充聚乙二醇饱和溶液；

S3：将样品置入包埋框中，并根据拍摄断面情况对样品进行放置；

S4：将包埋框浸入液氮罐内，待样品完全冰冻后取出；

S5：在-15℃～-25℃的条件下，将冰冻后的样品通过聚乙二醇饱和溶液固定设置于冰冻切片机内的样品托上；

S6：对样品进行粗切，并露出样品平面；

S7：利用摄影平台对粗切后的样品进行精确对焦；

S8：利用冰冻切片机对样品进行逐层切片，并利用摄影平台逐层拍摄断面图像；

S9：对断面图像进行集合形成数据集，并以切片顺序为断面图像进行编号。

2.根据权利要求1所述的一种小样品冰冻断面快速成像方法，其特征在于：所述步骤S1中摄影平台搭建，包括以下步骤：

S11：设置环形闪光灯，并连接环形闪光灯电源；

S12：安装三脚架，并在三脚架顶部设置三维云台；

S13：将照相机设置于三维云台，并安装快门线。

3.根据权利要求1所述的一种小样品冰冻断面快速成像方法，其特征在于：所述步骤S2中聚乙二醇饱和溶液在冷冻过程中会进行收缩。

4.根据权利要求1所述的一种小样品冰冻断面快速成像方法，其特征在于：所述步骤S3中样品放置方向根据所需拍摄断面为冠状面、矢状面或横切面进行决定。

5.根据权利要求1所述的一种小样品冰冻断面快速成像方法，其特征在于：所述步骤S4中样品应置于液氮液面下，浸泡时间为1分钟。

6.根据权利要求1所述的一种小样品冰冻断面快速成像方法，其特征在于：所述步骤S4中样品在浸泡过程中应保持晃动。

7.根据权利要求1所述的一种小样品冰冻断面快速成像方法，其特征在于：所述步骤S7中逐层切片与拍摄断面图像过程均在-20℃的温度条件下进行。

8.根据权利要求1所述的一种小样品冰冻断面快速成像方法，其特征在于：所述步骤S7中样品切片厚度为5μm～20μm。