[发明专利]一种高效液相色谱法测定吸入用复方异丙托溴铵溶液有关物质的方法

说明书

本发明涉及药物分析技术领域，特别涉及一种高效液相色谱法测定吸入用复方异丙托溴铵溶液有关物质的方法，所采用的方法为高效液相色谱法，其中各杂质的专属性、线性及范围、回收率、精密度、耐用性等试验均良好；通过本发明方法使各已知杂质均达到完全分离。本发明方法设计合理，仪器设备为已普及的高效液相色谱仪；且流动相配置简单、检测成本低，实现有关物质中各杂质的分离和定量测定。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，特别涉及一种高效液相色谱法测定吸入用复方异丙托溴铵溶液有关物质的方法。

背景技术

异丙托溴铵，分子式：C₂₀H₃₀BrNO₃，分子量412.4，CAS号：22254-24-6，医药上以其一水合物使用。异丙托溴铵主要用于缓解慢性阻塞性肺病引起的支气管痉挛、喘息症状；慢性阻塞性气管炎伴或不伴有肺气肿；轻到中度支气管哮喘。

目前吸入用复方异丙托溴铵溶液在美国药典中收载；英国药典、中国药典均未收载。而在USP有关物质检测条件：流动相A为2.7g/ml的磷酸二氢钾用磷酸调节至pH值3.9，流动相B为乙腈的条件下，使得硫酸沙丁胺醇杂质F、杂质R和异丙托溴铵杂质C分离度较差，硫酸沙丁胺醇杂质I和异丙托溴铵杂质D分离度为1.20，均不满足已知杂质完全分离且定量测定的要求。

现有技术中有针对异丙托溴铵气雾剂中杂质G的检测方法，其虽然也采用了液相色谱法进行检测，但是由于其针对的是异丙托溴铵气雾剂，该气雾剂中添加了柠檬酸、乙醇、水等诸多辅料，并采用特定的钢罐和铝合金包材，这些添加的辅料以及包材会对杂质的产生造成影响，而针对吸入用复方异丙托溴铵溶液而言，与上述的异丙托溴铵气雾剂无论从剂型上还是从成分组成上均有显著的不同，因此现有技术难以直接应用于复方异丙托溴铵溶液中相关物质的检测，能否提供一种针对复方异丙托溴铵溶液有关物质测定方法，成为本领域亟待解决的技术问题之一。

发明内容

针对现有技术中存在的诸多不足之处，本发明提供了一种高效液相色谱法测定吸入用复方异丙托溴铵溶液有关物质的方法，所采用的方法为高效液相色谱法，其中各杂质的专属性、线性及范围、回收率、精密度、耐用性等试验均良好；通过本发明方法使各已知杂质均达到完全分离。本发明方法设计合理，仪器设备为已普及的高效液相色谱仪；且流动相配置简单、检测成本低，实现有关物质中各杂质的分离和定量测定。

本发明的主要创新点在于：

本申请所针对的是以硫酸沙丁胺醇和异丙托溴铵两种物质为主要成分的吸入用复方异丙托溴铵溶液，该剂型的支气管扩张效应优于其任意单一成份的作用，与现有技术中的异丙托溴铵气雾剂有显著不同。而且吸入用复方异丙托溴铵溶液为供雾化器用的液体制剂，与气雾剂剂型差异较大，本申请中在进行高效液相色谱检测时，混合体系为异丙托溴铵和硫酸沙丁胺醇两种成份产生的所有杂质进行分离，而现有技术的丙托溴铵气雾剂中杂质G的检测方法中仅为异丙托溴铵相关的杂质的分离，两者具有显著的不同；

针对上述不同，发明人针对本发明的混合体系为异丙托溴铵和硫酸沙丁胺醇两种主成份可能产生的杂质进行检测，混合体系中硫酸沙丁胺醇杂质F、杂质R和异丙托溴铵杂质C分离度较差，硫酸沙丁胺醇杂质I和异丙托溴铵杂质D分离度为1.20，均不满足分离度的要求。发明人经过大量实验后，结合各杂质的性质发现异丙托溴铵杂质C和杂质D在酸性流动相中保留时间会延后，所以发明人在本发明中调节了流动相A的pH值使上述杂质得到更好的分离；

为了方便描述，发明人将本申请所涉及的各种杂质以英文字母的形式进行了简化，简化后杂质与其指代的具体物质如下表所示：

在上述指导思想的支持下，本发明所采用的具体技术方案如下：

一种高效液相色谱法测定吸入用复方异丙托溴铵溶液有关物质的方法，通过以下步骤实现：