[发明专利]一种缩宫素及三种脱酰胺杂质的分离方法和应用

说明书

本发明公开了一种缩宫素及三种脱酰胺杂质的分离方法和应用。其包括下述步骤：利用高效液相色谱检测供试品溶液即可；供试品溶液为含有缩宫素的水溶液；高效液相色谱检测中，采用梯度洗脱方式进行洗脱，流动相A为水相和乙腈的混合液，水相为10‑150mmol/L磷酸二氢钠溶液，pH值为4.8～6.5；水相与乙腈的体积比为95:5～85:15；流动相B为乙腈。本发明检测方法能够同时有效分离缩宫素及其3种脱酰胺杂质，具有专属性强、分离度好、分析速度快、灵敏度高等特点，可用于缩宫素原料和制剂有关物质的检测，实现缩宫素生产工艺中主要工艺杂质和潜在降解杂质的精确控制，提高缩宫素产品的质量。

技术领域

本发明涉及药物检测领域，更具体地，涉及一种缩宫素及三种脱酰胺杂质的检测方法。

背景技术

缩宫素又名催产素，是由8种氨基酸组成的九肽药物，分子式：C₄₃H₆₆N₁₂O₁₂S₂，分子量1007.2，结构式：Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH₂(1,6二硫键)。它能够刺激子宫收缩和乳汁排出，临床上主要用于诱导促进分娩、缩短第三产程、控制产后出血等。

缩宫素对温度和pH比较敏感，因环境温度或pH的变化在制备和贮藏中有可能生成3种缩宫素脱酰胺杂质，具体如表1所示：

表1

不同种类的杂质引入药物成品中，将会导致不同的用药安全性问题，在缩宫素原料合成阶段和制剂阶段都需要对这3种缩宫素脱酰胺杂质的含量进行严格控制。但是，这3种缩宫素脱酰胺杂质的结构与缩宫素类似，国内外药典(中国药典(2020版)、欧洲药典(EP9.8)、美国药典(USP41)和日本药典(JP17版))收载的缩宫素原料药及其注射液质量标准中给出的有关物质检测方法难以对其有效分离。

因此，建立一种能够同时有效分离缩宫素、[Glu⁴Asp⁵]缩宫素、[Glu⁴]缩宫素和[Asp⁵]缩宫素的高效液相色谱法，对于缩宫素的精确质量控制具有十分重要的意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服了现有技术无法同时有效分离缩宫素、[Glu⁴Asp⁵]缩宫素、[Glu⁴]缩宫素和[Asp⁵]缩宫素的缺陷，提供了一种能够同时分离缩宫素及其3种脱酰胺杂质的检测方法。本方法具有分离度好、分析速度快、灵敏度高等特点，可用于缩宫素原料药合成工艺和制剂工艺中过程质量控制和终产品的质量评价。

本发明通过以下技术方案解决上述技术问题。

本发明提供了一种缩宫素及3种脱酰胺杂质的分离方法，其包括下述步骤：利用高效液相色谱检测供试品溶液即可；

其中，所述供试品溶液为含有缩宫素的水溶液；所述高效液相色谱检测中，采用梯度洗脱方式进行洗脱，流动相A为水相和乙腈的混合液，所述水相为10-150mmol/L磷酸二氢钠溶液，pH值为4.8～6.5；所述水相与所述乙腈的体积比为(95:5)～(85:15)；流动相B为乙腈；

所述流动相A和所述流动相B的梯度洗脱条件如表2所述：

表2梯度洗脱条件