[发明专利]一种狼爪瓦松多糖的制备方法及其应用

权利要求书

1.狼爪瓦松多糖在制备抗癌药物中的应用，其特征在于，所述狼爪瓦松多糖的制备步骤如下：

(1)利用生物反应器培养狼爪瓦松愈伤组织，培养后收获，冲洗去除表面培养基，在45℃恒温箱中烘至恒重后收集愈伤组织干品；

(2)制备狼爪瓦松愈伤组织多糖粗提物

将步骤(1)中收集的愈伤组织干品浸泡在料液比为1:15的70％乙醇中，60℃下冷凝回流1h，抽滤，收集滤渣；滤渣再次进行冷凝回流，重复3次；合并滤渣，滤渣表面挥干乙醇后，用100℃热水提取1h，提取三次，每次抽滤的滤液进行合并；将滤液在45℃条件下，减压浓缩，加入乙醇沉淀离心，冷冻干燥，得狼爪瓦松愈伤组织多糖粗提物；

(3)大孔吸附树脂法纯化狼爪瓦松多糖

取预处理AB-8树脂上柱，按照进料浓度1.6mg·mL^-1，进料体积3BV，进料流速1BV·h^-1，洗脱剂浓度65％，洗脱体积3BV，洗脱流速2BV·h^-1的纯化条件进行纯化，收集流出液；

(4)将步骤(3)收集的流出液进行减压浓缩，40℃条件下烘干，得纯化后狼爪瓦松多糖；

步骤(1)所述利用生物反应器培养狼爪瓦松愈伤组织的具体步骤如下：在5L气球型气升式生物反应器中加入4L培养基：MS+BA 3.5mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+蔗糖30g·L^-1，pH5.8；接入15g·L^-1的狼爪瓦松愈伤组织；反应器通气量调节为300mL·min^-1，在温度25℃和每天光照30μmol·m^-2·s^-1条件下培养16h，25d后收获愈伤组织，用自来水充分冲洗去除表面培养基，在45℃恒温箱中烘至恒重后收集愈伤组织干品；

步骤(3)所述预处理AB-8树脂的具体步骤如下：将大孔吸附树脂AB-8用95％乙醇溶液浸泡24h后上柱，用95％乙醇流过树脂柱充分冲洗，用蒸馏水冲洗至无醇味后加入4％盐酸溶液浸泡树脂4h，之后用蒸馏水冲洗柱子，至流出液pH呈中性；加入4％的氢氧化钠溶液浸泡树脂4h，用蒸馏水冲洗柱子直至流出液pH呈中性。

2.权利要求1所述的狼爪瓦松多糖在制备抗炎药物中的应用。