[发明专利]一种液相色谱法分离测定格列吡嗪及其杂质的方法

说明书

本发明公开了一种通过高效液相色谱法分离测定格列吡嗪及其杂质的方法和用途，所述测定方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，其检测条件如下：色谱条件：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，流动相为：0.010～0.018mol/L磷酸二氢钾‑乙腈‑甲醇，用磷酸调节pH值至3.5～4.0，柱温：20～30℃，进样量：15～30μL，进样浓度：0.0003～2mg/mL，流速：0.8～1.2mL/min，检测波长：225nm，梯度洗脱。本发明方法精密度高，重复性好，回收率高，可以广泛用于不同来源的格列吡嗪原料药及其对应制剂的质量检测。

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及通过高效液相色谱法分离测定格列吡嗪及其杂质的方法。

背景技术

格列吡嗪(Glipizide)，是第二代磺酰脲类口服降糖药，适用于经饮食控制及体育锻炼疗效不满意的轻、中度II型糖尿病患者。格列吡嗪化学式为1-环己基-3-{4-[2-(5-甲基吡嗪-2-酰胺)-乙基]苯磺酰}脲，分子式为C₂₁H₂₇N₅O₄S，分子量为445.54，格列吡嗪的结构式为：

在格列吡嗪的生产和贮藏过程中，可能会由于起始物料和中间体去除不完全以及贮藏过程中生成的降解杂质而影响药物的纯度，这些影响药物纯度的物质称为有关物质。上述有关物质皆无治疗作用，还可能影响药物的稳定性和疗效，甚至危害人体健康。

格列吡嗪在生产和贮藏过程中，可产生以下杂质A～L的杂质，其结构式和化学式等信息如下表所示：

表1格列吡嗪有关物质表*

*欧洲药典EP9.7记载杂质A～J，中国药典2015版记载杂质A，美国药典USP42记载杂质A，D，E。

许海涛发表了《格列吡嗪欧洲药典杂质来源分析汇总》，该文献对欧洲药典(EP9.0)中所罗列的9种杂质(杂质A～I)以及杂质K和M进行了汇总及分析，对于各个杂质的产生途径及来源进行了总结和分类，分别从合成工艺角度及格列吡嗪在外部环境条件下进行降解两个方面进行了阐述，阐明了各杂质的潜在来源。

《欧洲药典EP9.7》中关于格列吡嗪的有关物质的记载，使用高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶(0.25m×4.6mm，5μm)为填充剂；以水(醋酸调节pH至3.5)-乙腈为流动相，梯度洗脱，波长225nm，流速1.0mL/min，进样体积50μL，用以分离格列吡嗪与杂质A～J(除杂质B，杂质B需要使用气相色谱法测定)。

《中国药典2020版》中关于隔离吡嗪的有关物质的记载，使用高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶(0.25m×4.6mm，5μm)为填充剂，以0.1mol/L磷酸二氢钠溶液(用2mol/L氢氧化钠溶液调节pH至6.00±0.05)-甲醇(55:45)为流动相，梯度洗脱，波长225nm，进样体积20μL，用以分离格列吡嗪与杂质A。