[发明专利]一种APPV病毒的PCR引物、探针及其鉴别方法

权利要求书

1.一种APPV病毒的PCR引物探针组，其特征在于，该PCR引物探针组中，上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.一种非诊断目的的用于鉴别APPV病毒的微滴式数字PCR方法，其特征在于，该方法采用的微滴数字PCR反应体系为：不含dUTP的ddPCR^TM Supermix for Probes、核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的上游引物、核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的下游引物、核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的探针、待检测样品的cDNA和水；若待检测样品有阳性微滴出现荧光信号，则含有APPV病毒。

3.根据权利要求2所述的微滴式数字PCR方法，其特征在于，该方法采用的微滴数字PCR反应程序为：95℃ 10min；94℃ 30 s，52.7℃ 60 s，共40个循环；98℃ 10min。

4.根据权利要求2所述的微滴式数字PCR方法，其特征在于，所述微滴数字PCR反应体系中，上游引物和下游引物的浓度均为450nM；探针浓度为250nM。

5.根据权利要求2所述的微滴式数字PCR方法，其特征在于，所述微滴数字PCR反应体系为：不含dUTP的ddPCR^TM Supermix for Probes 10μL、探针0.5μL、上游引物1μL、下游引物1μL、待检测样品的cDNA 2μL，最终补水至终体积20μL。