[发明专利]同时检测盐酸法舒地尔中基因毒性杂质5-异喹啉磺酸甲酯和5-异喹啉磺酸乙酯的方法

说明书

本发明公开了一种同时检测盐酸法舒地尔中基因毒性杂质5‑异喹啉磺酸甲酯和5‑异喹啉磺酸乙酯的方法。所述方法包括如下步骤：采用HPLC检测；HPLC检测的条件为：固定相为十八烷基硅烷键合硅胶；流动相A为体积分数为0.5%的三乙胺水溶液，采用磷酸调pH至7.0；流动相B为甲醇；梯度洗脱。在本发明检测条件下，两种杂质和盐酸法舒地尔能有效分离，且两种杂质的出峰良好，响应值较高。使用本发明方法可以大大提高检测的灵敏度，设备仪器均为普通，检测成本低廉，操作极为简便，大大节约了检测成本和检测时间。

技术领域

本发明涉及一种盐酸法舒地尔中基因毒性杂质的检测方法，属于药物分析技术领域。

背景技术

基因毒性杂质是指化合物本身直接或间接损伤细胞DNA，产生基因突变或体内诱变，具有致癌可能或者倾向。潜在的基因毒性的杂质从结构上看类似基因毒性杂质，有警示性，但未经试验证明的黄曲霉素类、亚硝胺化合物、甲基磺酸酯等化合物均为常见的基因毒性杂质。近年来各国的法规和机构如ICH、FDA、EMA等都对基因毒性杂质有了更明确的要求，越来越多的医药企业在新药研发过程中就着重关注基因毒性杂质的控制和检测。

盐酸法舒地尔潜在的基因毒性杂质5-异喹啉磺酸甲酯和5-异喹啉磺酸乙酯是在合成中间体时5-异喹啉磺酰氯与盐酸法舒地尔粗品制备的溶剂甲醇(甲醇中可能含有少量乙醇)反应生成的磺酸酯类化合物，在生产过程中可能传递到成品中。因此，为了更好地控制盐酸法舒地尔潜的基因毒性杂质，需要选取灵敏度高、简便快捷的方法进行检测，以保证产品的安全性和可靠性。

发明内容

本发明的目的是提供一种盐酸法舒地尔中基因毒性杂质的检测方法，在本发明检测条件下，两种杂质和盐酸法舒地尔能有效分离，且两种杂质的出峰良好，响应值较高。

本发明方法所涉及的基因毒性杂质为5-异喹啉磺酸甲酯和5-异喹啉磺酸乙酯，其中，5-异喹啉磺酸甲酯的结构式如式Ⅰ所示，分子式为C₁₀H₉NO₃S，分子量为223.25；5-异喹啉磺酸乙酯的结构式如式Ⅱ所示，分子式为C₁₁H₁₁NO₃S，分子量为237.28。

本发明采用HPLC检测盐酸法舒地尔中的两种基因毒性杂质。

本发明方法中，HPLC检测的条件如下：

固定相：固定相为十八烷基硅烷键合硅胶；

色谱柱为InertSustain AQ-C18，规格为250×4.6mm，5μm；

检测波长：238nm；

流动相A：体积分数为0.5％的三乙胺水溶液，采用磷酸调pH至7.0；

流动相B：甲醇；

洗脱方式：梯度洗脱；

所述洗脱梯度的程序为：

0～18min，流动相A的体积分数为99％；

18～35mim，流动相A的体积分数由99％下降至40％；

35～40mim，流动相A的体积分数保持为40％；

40～41mim，流动相A的体积分数由40％上升至99％；

41～50mim，流动相A的体积分数保持为99％。

流速：1.0±0.1mL/mim；

柱温箱温度：30±5℃；

进样量：20μl。