[发明专利]一种气单胞菌属内不同物种的条形码鉴定引物、鉴定方法和试剂盒有效
| 申请号： | 202010692281.7 | 申请日： | 2020-07-17 |
| 公开（公告）号： | CN111926094B | 公开（公告）日： | 2022-07-22 |
| 发明（设计）人： | 李梅;许承佳;李丹;林森馨;陈发明;李天宇;杨呈勇;刘贻尧;吴国锋;潘育方 | 申请（专利权）人： | 电子科技大学中山学院;中山市动物疫病预防控制中心（中山市动物卫生技术中心） |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6869;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星 |
| 地址： | 528402 *** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 气单胞菌属内 不同 物种 条形码 鉴定 引物 方法 试剂盒 | ||
1.一种气单胞菌属不同物种的条形码鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：
A、提取待测气单胞菌基因组DNA；
B、使用条形码鉴定引物进行PCR扩增，产物经琼脂糖凝胶电泳检测合格后进行测序；
C、将待测PCR产物序列作BLAST比对分析，以序列覆盖度大于98%且相似度大于98.8%作为筛选标准，GenBank数据库中满足此条件的物种与待测物种为同一物种；
所述的条形码鉴定引物为：F：5’-GGAATTCGCAACCGTTCTGGCTCAGGCTATCGT-3’；R：5’-TGTCGACGACGGCAGCCACTTTCAC-3’。
2.根据权利要求1所述的条形码鉴定方法，其特征在于，从GenBank上下载气单胞菌属代表种的cpn60序列，与待测序列一起构建系统发育树，聚为同一最小分支具有最高的同源性。
3. 根据权利要求1所述的条形码鉴定方法，其特征在于，所述的进行PCR扩增是：50μl的PCR反应体系，体系成分为：ddH2O 40μl、10×PCR Buffer 5μl、10mM的dNTPs 1μl、10μM的引物-F 1μl、10μM的引物-R 1μl、DNA模板1μl、2U/μl 的Taq DNA聚合酶1μl；PCR扩增条件为：94℃预变性5min；94℃变性30s、退火温度49℃，退火时间为30s、72℃延伸1min、共30个循环；72℃再延伸10min。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于电子科技大学中山学院;中山市动物疫病预防控制中心（中山市动物卫生技术中心），未经电子科技大学中山学院;中山市动物疫病预防控制中心（中山市动物卫生技术中心）许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202010692281.7/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种新能源汽车用一体式电动涡旋压缩机
- 下一篇：一种灌装枪自动找口机构
