[发明专利]用于构建胆管癌异种移植模型的移植体及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种制备用于构建胆管癌异种移植模型的移植体的方法，其特征在于，该方法包括：

a、将基质胶和胆管癌培养基混合，得到胆管癌培养基-基质胶混合物；

b、将酶解后的胆管癌组织与所述胆管癌培养基-基质胶混合物混合并进行培养扩增，得到包含胆管癌类器官的移植体；

所述包含胆管癌类器官的移植体包括胆管癌类器官和包裹在所述胆管癌类器官表面的包裹层；

步骤b中所述将酶解后的胆管癌组织与所述胆管癌培养基-基质胶混合物混合，包括：

将所述酶解后的胆管癌组织与所述胆管癌培养基-基质胶混合物混合，使得所述酶解后的胆管癌组织悬浮于所述胆管癌培养基-基质胶混合物中；其中，

相对于30000～40000个酶解后的胆管癌组织细胞，所述胆管癌培养基-基质胶混合物的用量为0.5～1 mL；

所述酶解后的胆管癌组织的制备方法包括：

（1）将胆管癌组织碎块与酶解液混合并进行酶解，得到酶解物料，其中，所述胆管癌组织包括胆管癌原发灶组织和/或胆管癌转移灶组织；所述酶解液中含有RPMI 1640培养基和2～5%的胎牛血清蛋白、1～3mg∕mL的胶原蛋白水解酶；相对于1重量份的所述胆管癌组织碎块，所述酶解液的用量为5～10体积份；

（2）将所述酶解物料进行离心，收集沉淀，得到酶解后的胆管癌组织，其中，所述离心的条件包括：离心力为300～500g，离心时间为3～5min。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述胆管癌培养基中含有RPMI 1640培养基和生长因子，所述生长因子包括青霉素、链霉素、Y-27632 2HCl、Y-27632、烟氨酸和牛血清白蛋白。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述胆管癌培养基中，青霉素的浓度为100～150 U/mL，链霉素的浓度为100～150 μg/ mL，Y-27632 2HCl的浓度为5～10 μM，Y-27632的浓度为5～10 μM，烟氨酸的浓度为5～15 mM，牛血清白蛋白的浓度为0.3～0.5 g/100mL。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤a中将基质胶和胆管癌培养基混合时，相对于1体积份的所述基质胶，所述胆管癌培养基的用量为3～5体积份。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述胆管癌类器官的直径为1.5～3mm，所述包裹层的厚度为1～3 mm。

6.一种生产胆管癌异种移植小鼠模型的方法，其特征在于，该方法包括：

将权利要求1～5中任意一项所述的方法制备得到的移植体植入免疫缺陷型小鼠的皮下和/或原位组织中，得到所述胆管癌异种移植小鼠模型。