[发明专利]用于构建胆管癌异种移植模型的移植体及其制备方法和用途

说明书

本公开涉及一种用于构建胆管癌异种移植模型的移植体及其制备方法和用途，制备方法包括：a、将基质胶和胆管癌培养基混合，得到胆管癌培养基‑基质胶混合物；b、将酶解后的胆管癌组织与所述胆管癌培养基‑基质胶混合物混合并进行培养扩增，得到包含胆管癌类器官的移植体。上述方法中，利用酶解后的胆管癌组织培养得到包含胆管癌类器官的移植体，利用该移植体构建胆管癌异种移植模型的成功率较高、所需时间较短。

技术领域

本公开涉及生物医药技术领域，具体涉及一种用于构建胆管癌异种移植模型的移植体及其制备方法和用途。

背景技术

胆管癌是指源于肝外胆管包括肝门区至胆总管下端的胆管的恶性肿瘤。其病因可能与胆管结石、原发性硬化性胆管炎等疾病有关。临床可采用手术治疗、放射治疗、化学治疗等方法，但效果不明显，预后较差。为了改善胆管癌的治疗效果，需要对胆管癌的致病机理、抗药性等进行深入研究，而动物性异种移植模型是用于研究的重要工具。

相关技术中，利用胆管癌患者的原发灶或者转移灶肿瘤组织块作为移植体，将移植体移植到免疫缺陷小鼠的皮下或原位组织中，从而构建胆管癌异种移植模型。

然而，利用胆管癌患者的原发灶或者转移灶肿瘤组织块作为移植体时，获取的组织量有限，构建胆管癌异种移植模型的成功率较低，且所需时间较长。

发明内容

本公开的目的是提供一种用于构建胆管癌异种移植模型的移植体及其制备方法和用途，将本公开提供的移植体用于构建胆管癌异种移植模型时，可在少量组织条件下，获得较高的成功率，且构建异种移植模型所需时间较短。

为了实现上述目的，第一方面，本公开提供一种制备用于构建胆管癌异种移植模型的移植体的方法，该方法包括：

a、将基质胶和胆管癌培养基混合，得到胆管癌培养基-基质胶混合物；

b、将酶解后的胆管癌组织与所述胆管癌培养基-基质胶混合物混合并进行培养扩增，得到包含胆管癌类器官的移植体。

可选地，所述胆管癌培养基中含有RPMI 1640培养基和生长因子，所述生长因子包括青霉素、链霉素、Y-27632 2HCl、Y-27632、烟氨酸和牛血清白蛋白。

可选地，所述胆管癌培养基中，青霉素的浓度为100～150U/mL，链霉素的浓度为100～150μg/mL，Y-27632 2HCl的浓度为5～10μM，Y-27632的浓度为5～10μM，烟氨酸的浓度为5～15mM，牛血清白蛋白的浓度为0.3～0.5g/100mL。

可选地，步骤a中将基质胶和胆管癌培养基混合时，相对于1体积份的所述基质胶，所述胆管癌培养基的用量为3～5体积份。

可选地，步骤b中所述将酶解后的胆管癌组织与所述胆管癌培养基-基质胶混合物混合，包括：

将所述酶解后的胆管癌组织与所述胆管癌培养基-基质胶混合物混合，使得所述酶解后的胆管癌组织悬浮于所述胆管癌培养基-基质胶混合物中；其中，

相对于30000～40000个酶解后的胆管癌组织细胞，所述胆管癌培养基-基质胶混合物的用量为0.5～1mL。

可选地，所述酶解后的胆管癌组织的制备方法包括：

(1)将胆管癌组织碎块与酶解液混合并进行酶解，得到酶解物料，其中，所述胆管癌组织包括胆管癌原发灶组织和/或胆管癌转移灶组织；所述酶解液中含有RPMI 1640培养基和2～5％的胎牛血清蛋白、1～3mg/mL的胶原蛋白水解酶；相对于1重量份的所述胆管癌组织碎块，所述酶解液的用量为5～10体积份；

(2)将所述酶解物料进行离心，收集沉淀，得到酶解后的胆管癌组织，其中，所述离心的条件包括：离心力为300～500g，离心时间为3～5min。