[发明专利]一种新型冠状病毒、MERS与甲/乙型流感病毒四合一快速检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种新型冠状病毒、MERS与甲/乙型流感病毒四合一快速检测试剂盒，检测条A的释放垫上喷涂有彩色乳胶标记的抗新型冠状病毒S1蛋白多抗和彩色乳胶标记的捕获型抗甲型流感病毒单抗，检测条B的释放垫上喷涂有彩色乳胶标记的抗MERS病毒S1蛋白多抗和彩色乳胶标记的捕获型抗乙型流感病毒单抗，检测条A和检测条B组装于一张双联卡板，即构成所述的试剂盒；其中检测条A用于检测新型冠状病毒与甲型流感病毒，检测条B用于检测MERS与乙型流感病毒。本发明的试剂盒检测方便快速，3‑15分种内可同时判断出4种不易区分的病毒性流行病，可应用于医院检测、居家检测、流行病调查、以及大规模筛查诊断，适用于全球冠状病毒和流感病毒疫情监控。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种新型冠状病毒、MERS与甲/乙型流感病毒四合一快速检测试剂盒。

背景技术

冠状病毒在系统分类上属冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)。冠状病毒属的病毒是具外套膜(envelope)的正链单股RNA病毒，直径约80～120nm，其遗传物质是所有RNA病毒中最大的，感染宿主包括人、鼠、蝙蝠、猪、猫、穿山甲、犬、狼、鸡、牛、蛇类、禽类等脊椎动物。2019新型冠状病毒(SARS-CoV-2)是目前已知的第7种可以感染人的冠状病毒，其余6种分别是HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、SARS-CoV和MERS-CoV。研究表明，其中SARS-CoV-19、SARS-CoV和HCoV-NL63是通过病毒包膜spike glycoprotein(S-protein)介导病毒与宿主细胞膜上的ACE2受体相互作用来感染人的。人感染了新型冠状病毒后常见体征有呼吸道症状、发热、咳嗽、气促和呼吸困难等。在较严重病例中，感染可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭，甚至死亡。

流行性感冒病毒(Influenza viruses,Flu)简称流感病毒，是引起流行性感冒的病原体，流行性感冒是由甲、乙、丙三型流感病毒分别引起的急性呼吸道传染病，它传染性强、传播快、潜伏期短、发病率高。甲型流感病毒常以流行形式出现，能引起世界性流感大流行，它在动物中广泛分布，并也能在动物中引起流感流行和造成大量动物死亡。乙型流感病毒常常引起局部爆发，不引起世界性流感大流行。丙型流感病毒主要以散在形式出现，主要侵袭婴幼儿，一般不引起流行。因此对于甲型和乙型流感病毒的检测有相对较大的临床意义。

MERS病毒是一种β属C亚群冠状病毒，全名为中东呼吸综合征冠状病毒，感染后引发中东呼吸综合征(Middle East Respiratory Syndrome，简称MERS)大多数MERS病毒感染病例发生在中东地区。一般人很难从症状上区分出新冠肺炎、MERS和流感，甚至一些检测试剂盒存在严重的交叉反应。因而研发一种可快速区分出新冠肺炎、MERS和流感的居家检测检试剂盒对全球冠状病毒和流感病毒流行和疫情监控具有重要意义。

发明内容

针对现有技术存在的上述技术问题，我们根据配体与受体特异性结合的原理，发明了一种新型冠状病毒、MERS与甲/乙型流感病毒四合一快速检测试剂盒。新型冠状病毒的棘突蛋白有2个亚基，S1和S2，其中S1亚基作为配体与人细胞膜上的ACE2受体相互作用形成高亲和力的特异性结合。依据夹心法免疫层析原理，我们用重组的人ACE2蛋白替代其中一个抗新冠病毒S-蛋白单抗来标记彩色乳胶并喷涂于试纸条的释放垫上，检测时如果检测样本中有新冠病毒，则可通过ACE2与样本中的新冠病毒结合使病毒颗粒带上彩色乳胶，并在层析中被包被于新冠检测线的抗新冠病毒棘突蛋白S1的兔多抗结合而显色；如果检测样本中没有新冠病毒，则新冠检测线不显色。