[发明专利]一种递送siRNA的壳聚糖衍生物纳米颗粒的制备方法有效
申请号: | 202010699292.8 | 申请日: | 2020-07-20 |
公开(公告)号: | CN111840575B | 公开(公告)日: | 2022-02-11 |
发明(设计)人: | 郑磊;颜玲;刘长虹;高胜杰;刘帅 | 申请(专利权)人: | 合肥工业大学 |
主分类号: | A61K48/00 | 分类号: | A61K48/00;A61K31/713;A61K9/51;A61K47/69;A61P35/00;A61P35/04 |
代理公司: | 合肥金安专利事务所(普通合伙企业) 34114 | 代理人: | 金惠贞 |
地址: | 230009 安*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 递送 sirna 聚糖 衍生物 纳米 颗粒 制备 方法 | ||
1.一种递送siRNA的壳聚糖衍生物纳米颗粒的制备方法,其特征在于操作步骤如下:
将带正电的浓度1 mg/mL的壳聚糖盐酸盐溶液和浓度7.24 μM的siRNA溶液混合均匀,加入带负电的浓度2 mg/mL的羧甲基壳聚糖溶液,磁力搅拌;通过分子间静电相互作用自组装形成递送siRNA的壳聚糖衍生物纳米系统颗粒;
其中壳聚糖盐酸盐溶液、siRNA溶液和羧甲基壳聚糖溶液的体积比为30~60:5:60~30;
所述带正电的浓度1 mg/mL的壳聚糖盐酸盐溶液由10 mg的壳聚糖盐酸盐加入到10 mL超纯水中直至完全溶解制得;
所述带负电的浓度2 mg/mL的羧甲基壳聚糖溶液由20 mg的羧甲基壳聚糖加入到10 mL超纯水中直至完全溶解制得;
具体制备操作如下:
将50 μL浓度7.24 μM的siRNA溶液逐滴加入300 μL的带正电的浓度1 mg/mL的壳聚糖盐酸盐溶液,搅拌混合,再逐滴加入600 μL带负电的浓度2 mg/mL的羧甲基壳聚糖溶液,磁力搅拌;通过分子间静电相互作用自组装形成递送siRNA的壳聚糖衍生物纳米系统颗粒;
所述递送siRNA的壳聚糖衍生物纳米颗粒,在pH值 2.2的胃环境中siRNA累积释放率为11.08%,有效保护siRNA不被降解;在pH值5.5的模拟结肠癌细胞环境中,超声刺激siRNA-CDNPs释放靶向siRNA,累积释放率为70.07%。
2.根据权利要求1所述的一种递送siRNA的壳聚糖衍生物纳米颗粒的制备方法,其特征在于:所述磁力搅拌为转速800-1300 rpm条件下的磁力搅拌。
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