[发明专利]一种杞菊地黄丸指纹图谱的检测方法及其应用

说明书

本发明提供一种杞菊地黄丸指纹图谱的检测方法。本发明还提供了上述杞菊地黄丸指纹图谱的检测方法在杞菊地黄丸中成分的质量检测中的用途及其质量检测方法。本发明进一步提供了上述杞菊地黄丸中9种成分含量的测定方法。本发明更进一步提供了一种杞菊地黄丸中多味药材指纹图谱的筛选方法。本发明提供的一种杞菊地黄丸指纹图谱的检测方法及其应用，建立了杞菊地黄丸的高效液相指纹图谱，能够对杞菊地黄丸中9个化学成分进行了定量分析，并对杞菊地黄丸中各单味药材色谱峰进行了归属确证，能够从原料源头进行有效监测，严格控制原药材的质量，保证杞菊地黄丸成分中有效成分的量相对稳定，从而保证临床用药的安全有效。

技术领域

本发明属于中药成分检测的技术领域，涉及一种杞菊地黄丸指纹图谱的检测方法及其应用，具体涉及一种杞菊地黄丸指纹图谱的检测方法及其在质量检测中应用。

背景技术

杞菊地黄丸，为滋肾养肝用药，临床用于肝肾阴亏，眩晕耳鸣，羞明畏光，迎风流泪，视物昏花。虽然杞菊地黄丸揭示了其中药材组成，由8味药组成，分别为枸杞子、熟地黄、牡丹皮、茯苓、菊花、酒萸肉、山药和泽泻，但其所含化学成分极其复杂。而2020版《中华人民共和国药典》中，仅对杞菊地黄丸的的性状、显微鉴别和丸项通则检查进行了规定，对枸杞子作了薄层鉴别，并对诺苷、马钱苷和丹皮酚作了定量要求，并不能全面、准确地评价其整体质量。

中药指纹图谱具有整体、宏观、模糊分析等特点，可通过对中药整体特征的描述，采用适当模糊处理方式，能较全面地反映出其内含化学成分的种类及数量，达到整体质量控制的目的，因此成为中药质量控制的有效手段，已广泛应用于中药质量监测和评价领域。其中色谱指纹图谱分析可以使中药所含多种化学组分的整体特征可视化，从而披露出常规检验难以发现的质量问题。指纹图谱是根据中药多组分、多靶点的整体综合作用的特点，从“全成分”的角度出发的一种现代中药质量控制方法，对非单一成分药物的质量控制更加全面。目前缺乏对杞菊地黄丸进行系统的定性定量研究。因此，有必要建立杞菊地黄丸的指纹图谱与多成分含量测定，能够完成对杞菊地黄丸中成分的定性定量分析，以便对杞菊地黄丸进行有效的质量控制。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种杞菊地黄丸指纹图谱的检测方法及其应用，采用优化条件的前处理及高效液相色谱方法，建立了杞菊地黄丸的高效液相指纹图谱，从不同侧面突出反映不同类别化学成分对杞菊地黄丸指纹图谱系统的贡献，从而实现对杞菊地黄丸全方化学成分的检测，较全面的反映杞菊地黄丸中各成分的现状，为整体控制和评价杞菊地黄丸质量提供参考依据。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明第一方面提供一种杞菊地黄丸指纹图谱的检测方法，包括以下步骤：

1)供试品溶液的制备：将杞菊地黄丸样品，加入甲醇水溶液，超声提取后，取上清液过滤，即得供试品溶液；

2)对照品溶液的制备：将5-羟甲基糠醛、莫诺苷、绿原酸、马钱苷、芍药苷、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、丹皮酚、23-乙酰泽泻醇B对照品，加入甲醇水溶液溶解，配成对照品溶液；

3)测定：采用相同色谱条件的高效液相色谱(HPLC)法分别测定供试品溶液和对照品溶液，获得供试品溶液的指纹图谱和对照品溶液的指纹图谱，将供试品溶液的指纹图谱与对照品溶液的指纹图谱进行比较，对供试品溶液指纹图谱中的指标成分进行归属定位，从而获得杞菊地黄丸指纹图谱。

优选地，步骤1)中，所述杞菊地黄丸样品为将杞菊地黄丸粉碎后获得的粉末样品。

优选地，步骤1)中，所述杞菊地黄丸样品加入的重量(g)与所述甲醇水溶液加入的体积(mL)之比为4：120-130。更优选地，所述杞菊地黄丸样品加入的重量(g)与所述甲醇水溶液加入的体积(mL)之比为4：125。

优选地，步骤1)中，所述杞菊地黄丸样品和甲醇水溶液称取后需要进行称重。

优选地，步骤1)中，所述超声提取时间为20-40min。更优选地，所述超声提取时间为30min。