[发明专利]一种新型的免疫检查点激活免疫共刺激的重组溶瘤痘苗病毒及其构建方法和应用在审
申请号: | 202010708056.8 | 申请日: | 2020-07-21 |
公开(公告)号: | CN112094823A | 公开(公告)日: | 2020-12-18 |
发明(设计)人: | 魏继武;左曙光;魏敏;王士群;董杰;陈安仙 | 申请(专利权)人: | 南京大学 |
主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;C12N15/863;A61K35/768;A61K38/17;A61K48/00;A61P35/00;C12R1/93 |
代理公司: | 江苏银创律师事务所 32242 | 代理人: | 何震花 |
地址: | 225300 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 新型 免疫 检查点 激活 刺激 重组 痘苗 病毒 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种新型的阻断免疫检查点并激活免疫共刺激信号通路的重组溶瘤痘苗病毒,其特征在于:所述的重组溶瘤痘苗病毒基因组的胸苷激酶TK区包含CD155蛋白胞外区基因,并且能够表达可溶性蛋白sCD155。
2.根据权利要求1所述的新型的阻断免疫检查点并激活免疫共刺激信号通路的重组溶瘤痘苗病毒,其特征在于:所述的可溶性蛋白sCD155的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
3.根据权利要求1所述的新型的阻断免疫检查点并激活免疫共刺激信号通路的重组溶瘤痘苗病毒,其特征在于:所述的重组溶瘤痘苗病毒能够溶瘤。
4.权利要求1所述的新型阻断免疫检查点和激活免疫共刺激通路的重组溶瘤痘苗病毒VV-sCD155的构建方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)人工合成sCD155基因片段,所述的基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;
(2)采用酶切法将sCD155基因片段亚克隆至痘苗病毒穿梭质粒pVV-EGFP中,构建成pVV-sCD155穿梭质粒;
(3)用pVV-sCD155穿梭质粒转染已经预先感染野生痘苗病毒的细胞,使质粒和野生痘苗病毒发生同源重组,产生重组痘苗病毒VV-sCD155,经鸟嘌呤-次黄嘌呤磷酸核糖转移酶gpt抗性筛选和空斑纯化法去除野生病毒,获得重组痘苗病毒VV-sCD155。
5.权利要求1所述的新型的阻断免疫检查点并激活免疫共刺激信号通路的重组溶瘤痘苗病毒在制备活化抗肿瘤免疫药物中的应用。
6.权利要求1所述的新型的阻断免疫检查点并激活免疫共刺激信号通路的重组溶瘤痘苗病毒在制备刺激IFN-γ表达药物中的应用。
7.权利要求1所述的新型的阻断免疫检查点并激活免疫共刺激信号通路的重组溶瘤痘苗病毒在制备抗肿瘤药物中的应用。
8.根据权利要求5至7任一项所述的应用,其特征在于:所述的肿瘤为腹水癌、乳腺癌或结肠癌。
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