[发明专利]一种抗肥胖活性化合物的筛选方法

说明书

本发明提供一种抗肥胖活性化合物的筛选方法，包括以下步骤：首先基于3T3‑L1前脂肪细胞膜脂质筏主要成分及含量理论构建脂质筏代表体系并通过分子动力学软件对脂质筏体系进行非限制性分子动力学平衡；汇总不同结构多酚抑制前脂肪细胞分化的IC₅₀值以及多酚分子结构参数和对脂质筏结构影响的数据；使用多元统计法建立不同结构多酚抑制前脂肪细胞分化的IC₅₀值与不同结构多酚对脂质筏影响的理论关系式，寻找关键评价指标；最后基于关键评价指标通过聚类分析进行不同活性化合物的分类并通过实验进行验证。本发明所述筛选方法成本低，稳定性强，筛选结果可靠，配合分子动力学和多元统计法等，为高效快速寻找抗肥胖活性化合物提供便捷。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，特别是涉及一种抗肥胖活性化合物的筛选方法。

背景技术

肥胖和脂质代谢异常已成为当今全球普遍关注的健康问题，不仅影响人们的行为方式，此外还是糖尿病、心脑血管等疾病的重要诱因。研究显示，某些地区饮食如地中海(Mediterranean)饮食可有效降低心脑血管疾病发生的有益效果主要归因于饮食中富含大量的膳食因子。

细胞膜是介导外源物质进入或是保护细胞的屏障，在细胞的生命活动中起着至关重要的作用，由于细胞膜结构十分复杂且组成不均一，在细胞膜表面通过脂质-脂质相互作用、脂质-蛋白质相互作用等会形成不均一、高度动态的、富含胆固醇和鞘磷脂的极其有序的微域，被称为“脂质筏”。由于脂质筏上存在大量的调节细胞生长、分化等受体信号蛋白，介导着细胞内一系列信号通路，控制着细胞正常的生长、增殖、分化以及凋亡等，而且这些受体蛋白的活性依赖于脂质筏的完整结构，因而脂质筏也被看作是细胞内外信号传递平台。

研究显示，天然化合物具有数量庞大，结构多样，毒副作用小，药效确切可靠等优势，由此成为新药筛选的主要来源。但其成分复杂，作用机制不明确，使其成分分离与活性筛选费时费力。通常在完成繁琐且艰巨的分离提取、分析鉴定过程之后，含量较低的天然产物还需在动物、器官(组织)和细胞水平模型上进行筛选，现有技术的方法筛选成本高、所需样品量大、实验周期长，不适合进行大规模、高通量的筛选。多酚类化合物因其种类繁多，分布广泛，同时又具有降血脂，降血糖，减肥等多种作用，往往被视为优良的膳食因子并一直备受关注。正因为多酚类化合物种类繁多，通过传统实验进行筛选，工作量大，耗费时间，人力，物力和财力，且效率低，近些年来发展的计算机模拟技术结合可视化技术可以从新的角度阐释化合物相互作用的方式等。

发明内容

本发明的目的在于提供一种以细胞膜脂质筏为靶标的抗肥胖活性化合物的筛选方法，该筛选方法操作简单，成本低，能够准确快速筛选出高活性抗肥胖化合物。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种抗肥胖活性化合物的筛选方法，包括以下步骤：

(1)进行3T3-L1前脂肪细胞膜脂质筏体系的理论构建，并判断该体系是否达到平衡；

(2)实验测定不同结构多酚化合物抑制前脂肪细胞分化的IC₅₀；

(3)进行多酚化合物分子结构参数的理论计算及不同结构多酚与脂质筏的分子动力学模拟；

(4)采用多元统计法建立不同结构多酚化合物抑制前脂肪细胞分化的IC₅₀与不同结构多酚对脂质筏影响的理论关系式，所述理论关系式为Y＝238.32-16.93X₁-24.00X₅+84.44X₁₁，R²＝0.94，其中，Y为多酚化合物的IC₅₀，_,X₁为多酚分子与脂质筏形成的氢键个数，X₅为多酚分子的疏水性，X₁₁为多酚分子与胆固醇的距离；