[发明专利]一种诊断泡型棘球蚴病的ELISA方法

权利要求书

1.一种诊断泡型棘球蚴病的ELISA方法，其特征在于所述方法包括如下步骤：

（1）抗原包被：用包被液将抗原rEmAgB3-GGGS-Em18稀释成1 μg/mL，加入酶标板，置于4℃过夜；

（2）洗涤：弃去包被液，PBST洗涤3次后，拍干；

（3）封闭： 加入1% BSA ，37℃恒温箱中孵育2 h；

（4）洗涤：弃去封闭液，PBST洗涤3次后，拍干；

（5）一抗孵育：加入稀释后的待测血清，37℃孵育2 h；

（6）洗涤：弃去一抗，PBST洗涤3次后，拍干；

（7）二抗孵育：加入山羊抗人IgG酶标二抗（1:10000稀释），37℃孵育2 h；

（8）洗涤：弃去二抗，PBST洗涤3次后，拍干；

（9）显色：加入TMB底物，37℃避光孵育10 min；

（10）终止：加入2 mol/L的H₂SO₄终止反应；

（11）测定：将酶标板置于酶标仪中在450nm波长下进行测定吸光光度值（OD_450nm）；

（12）判定：OD_450nm≥0.405判定为阳性； OD_450nm≤0.353判为阴性；0.353＜OD_450nm＜0.405判为可疑。

2.根据权利要求1所述的一种诊断泡型棘球蚴病的ELISA方法，其特征在于所述步骤（1）中的抗原rEmAgB3-GGGS-Em18，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO:M 2019622。

3.根据权利要求2所述的一种诊断泡型棘球蚴病的ELISA方法，其特征在于所述步骤（5）中待测血清的稀释比例为1:100。