[发明专利]用于改进细胞核/细胞质RNA分离效率的RNA提取方法及应用在审
| 申请号： | 202010713846.5 | 申请日： | 2020-07-22 |
| 公开（公告）号： | CN111793620A | 公开（公告）日： | 2020-10-20 |
| 发明（设计）人： | 曾妮 | 申请（专利权）人： | 曾妮 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人： | 张金铭 |
| 地址： | 510051 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 改进 细胞核 细胞质 rna 分离 效率 提取 方法 应用 | ||
1.一种用于改进细胞核/细胞质RNA分离效率的RNA提取方法，其特征在于，所述提取方法包括：向细胞中加入胞膜裂解液后进行细胞计数，当死亡细胞占总细胞量的60-80％时停止裂解，将裂解产物进行核质分离并分别提取RNA。
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，加入裂解液后每3-5分钟进行一次细胞计数，至死亡细胞占总细胞量的60-80％。
3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，通过台盼蓝染色法进行细胞计数。
4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，将裂解产物通过过滤的方式，实现核质成分分离；
优选地，将裂解产物通过硅胶膜或超细玻璃纤维膜过滤。
5.根据权利要求4所述的提取方法，其特征在于，将裂解产物加入含有超细玻璃纤维过滤柱的离心管中进行过滤，实现核质成分分离。
6.根据权利要求4或5所述的提取方法，其特征在于，过滤后还包括清洗的步骤。
7.根据权利要求6所述的提取方法，其特征在于，通过离心的方式进行清洗；
优选地，所述离心的条件为2500-3500g，离心8-12分钟，优选为3000g，离心10分钟。
8.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，分离后的细胞质的RNA提取方法包括酚-氯仿法或离心柱法。
9.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，分离后的细胞核的RNA提取方法包括先对细胞核进行裂解处理，再采用酚-氯仿法或离心柱法提取细胞核RNA。
10.如权利要求1-9任一项所述的提取方法在功能基因组学领域中的应用。
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