[发明专利]一种神经根受压损伤大鼠动物模型的构建方法在审
申请号: | 202010713984.3 | 申请日: | 2020-07-22 |
公开(公告)号: | CN112219793A | 公开(公告)日: | 2021-01-15 |
发明(设计)人: | 徐乐勤;周瑞娟;卢晓惠;陈海鹏;林桦楠 | 申请(专利权)人: | 厦门市中医院 |
主分类号: | A01K67/027 | 分类号: | A01K67/027;A61K49/00 |
代理公司: | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人: | 张松亭;姜谧 |
地址: | 361000 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 神经 受压 损伤 大鼠 动物 模型 构建 方法 | ||
1.一种神经根受压损伤大鼠动物模型的构建方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)制备一直角三角形的橡胶块;
(2)通过手术以完全暴露大鼠的L5的神经根;
(3)将上述橡胶块插入椎管并压迫L5的上述神经根;
(4)直至无法再将上述橡胶块插入后,将切口逐层缝合以固定上述橡胶块;
(5)正常饲养大鼠,定期采用HE染色观察大鼠的背根神经节的组织学变化情况,用TUNEL染色观察背根神经节的细胞凋亡的情况,用分光光度法检测caspase-3的活性情况,以及用western blot观察细胞因子的蛋白表达情况。
2.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于:所述大鼠为Sprague-Dawley大鼠。
3.如权利要求2所述的构建方法,其特征在于:所述大鼠为2月龄。
4.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于:所述橡胶块的二直角边分别长3.5-4.5μm和1.5-2.5μm,厚度为0.8-1.2μm。
5.如权利要求4所述的构建方法,其特征在于:所述橡胶块的二直角边分别长4μm和2μm,厚度为1μm。
6.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于:所述细胞因子包括PARP、Bax、Bcl-2、Fas和TNF-α。
7.如权利要求1至6中任一权利要求所述的构建方法,其特征在于:所述步骤(2)为:通过手术将大鼠的L5的左椎板暴露出来,然后剥离L5的部分关节突和左椎板以完全暴露其神经根。
8.如权利要求1至6中任一权利要求所述的构建方法,其特征在于:所述HE染色包括:将大鼠的左侧L5的背根神经节用4%多聚甲醛固定后,于梯度浓度蔗糖中进行脱水,包埋与OCT胶中进行组织切片,切片的厚度为6μm,然后进行HE染色。
9.一种权利要求1至8中任一权利要求所述的构建方法得到的神经根受压损伤大鼠动物模型。
10.权利要求9所述的神经根受压损伤大鼠动物模型在筛选治疗脊柱退行性疾病中的应用。
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