[发明专利]一种无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基及其应用有效
申请号: | 202010714550.5 | 申请日: | 2020-07-21 |
公开(公告)号: | CN111690595B | 公开(公告)日: | 2021-07-16 |
发明(设计)人: | 陈东煌;陈海佳;姜交华;张兆清;王小燕;李学家 | 申请(专利权)人: | 生物岛实验室;广东国科细胞科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0735 | 分类号: | C12N5/0735;C12N5/074 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 巩克栋 |
地址: | 510320 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 血清 饲养 胚胎 干细胞 多能 培养基 及其 应用 | ||
1.一种无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基,其特征在于,所述无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基包括基础培养基和添加剂,所述添加剂包括肝素钠、哌啶酸、γ-氨基丁酸、锂离子盐、pH调节剂、硒补充剂、铁补充剂、抗氧化剂、重组人碱性成纤维细胞生长因子、重组人转化生长因子β、谷胱甘肽、丙戊酸、D-泛酸钙和硫酸锌;且肝素钠、哌啶酸、γ-氨基丁酸、锂离子盐在所述无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基中的浓度分别为10-200 ng/mL、0.05-5 μg/mL、10-200 μg/mL、10-150 μg/mL。
2.如权利要求1所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基,其特征在于,所述肝素钠在所述无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基中的浓度为60-100 ng/mL。
3.如权利要求1所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基,其特征在于,所述哌啶酸在所述无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基中的浓度为0.05-0.15 μg/mL。
4.如权利要求1所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基,其特征在于,所述γ-氨基丁酸在所述无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基中的浓度为30-70 μg/mL。
5.如权利要求1所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基,其特征在于,所述锂离子盐在所述无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基中的浓度为20-60 μg/mL。
6.如权利要求1所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基,其特征在于,所述基础培养基包括DMEM/F12培养基。
7.如权利要求1所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基,其特征在于,所述锂离子盐包括氯化锂。
8.如权利要求1所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基,其特征在于,所述无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基的pH值为7.0-7.4。
9.如权利要求1所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基,其特征在于,所述pH调节剂包括碳酸氢钠。
10.如权利要求1所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基,其特征在于,所述硒补充剂包括亚硒酸钠。
11.如权利要求1所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基,其特征在于,所述铁补充剂包括乙二胺四乙酸铁。
12.如权利要求1所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基,其特征在于,所述抗氧化剂包括L-抗坏血酸。
13. 如权利要求1所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基,其特征在于,所述pH调节剂、硒补充剂、铁补充剂、抗氧化剂、重组人碱性成纤维细胞生长因子、重组人转化生长因子β、谷胱甘肽、丙戊酸、D-泛酸钙和硫酸锌在所述无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基中的浓度分别为100-1000 mg/L、1-50 μg/L、100-400 μM、30-100 mg/L、5-100 μg/L、1-20 μg/L、1-50 mg/L、20-200 mg/L、1-20 mg/L和1-50 μg/L。
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