[发明专利]一种五倍子树多倍体育种方法

说明书

本发明公开一种五倍子树多倍体育种方法，其主要采用不同浓度的诱导剂对选取的五倍子种子或幼苗子叶或培养基繁殖材料进行多倍体诱导，其操作简单易行，诱导效果显著。且本发明采用了对植物微管有更高的亲和性的诱导剂替代常用的毒性较大并对人体有害的诱导剂秋水仙素，其在较低的浓度下便有较高的微管蛋白解聚能力，对人体和植物材料的毒性较低，安全性高且诱导的效率高。

技术领域

本发明属于农业繁殖方法领域,具体涉及一种五倍子树多倍体育种方法。

背景技术

多倍体是指体细胞中含有3套或3套以上染色体组的生物体，多倍体植物在自然界中普遍存在。多倍体育种是指采用人工诱变的方法将植物的染色体组进行加倍，或者直接从自然界中选育出染色体加倍的突变体，从而获得新品种的方法。多倍体育种可以显著缩短育种年限，提高育种效率，增强植物品质和抗逆性，具有广阔的发展前景。多倍体植物在生理上较二倍体有更大的优势，如形态巨大、产量和营养价值增加、抗性增强等，以及在遗传上有更高的可塑性，因此近年来广泛应用于农业生产和遗传研究，如农作物、果树、花卉、蔬菜等的品种选育、克服远缘杂交的不孕性、提高杂种可育性等。

五倍子树又名盐肤木(Rhus Chinensis)，为漆树科(Anacardiaceae)盐肤木属落叶小乔木或灌木，在我国分布广泛，资源丰富，具有很好的药用和经济价值，其不仅是很好的观赏植物，其根、叶、花和果实都可入药，种子可用来榨油，而在西南地区，盐肤木是西南地区秋季的主要蜜源，盐肤木蜜产量稳定，整个花期可取2～3次成熟蜜，群产10～15kg，丰产年景可达20kg以上。

因此具有高产，经济效益高的五倍子树的品种选育是极具有意义的，但是用传统的育种方法来进行品种选育，育种周期长、效率低、预见性差。多倍体育种为植物品种选育提供了一个重要途径。

发明内容

因此基于以上背景，为了在于丰富盐肤木种质资源，培育花期长、泌蜜量多、花朵大、抗逆性和适应性强的新品种，获得优良的多倍体植株，本发明提供一种五倍子树多倍体育种方法，培育的多倍的五倍子树可采用扦插的方式来保持其优良种性。

本发明采用的技术方案为：

一种五倍子树多倍体育种方法，包括以下步骤：

(1)对种质资源进行调查和收集，建立资源库

对收集的种质资源进行观察，对收集的种质的原五倍子树的花期、泌蜜量、花朵大小、抗逆性进行记录，建立分级标准，筛选出性状优良的二倍体五倍子树；

(2)预实验诱导剂浓度

根据步骤1)的筛选出的优良植株，取其健康种子及子叶期幼苗，进行预实验研究种子或幼苗对诱导剂的抗药性，得出大致的诱导剂的有效使用浓度范围及诱变处理时间范围。

(3)诱导剂诱导

(4)对步骤(3)经诱导处理后的培育的植株采用流式细胞仪技术进行倍性鉴定；

(5)对步骤(4)经鉴定为多倍体的植株进行分离并进行繁育；

(6)对步骤(5)繁育的植株进行筛选，筛选出综合形状/特点突出的新品种；

(7)对步骤(6)筛选出的新品种进行遗传变异研究

①采用形态学初步鉴定方法对植株的变异情况进行观察；

②在显微镜下观察和测量花粉粒和气孔保卫细胞的长直径×宽直径，以及气孔数，分别测量20个细胞，取平均值；

③通过根尖、茎尖、嫩叶、花粉母细胞等分裂活跃部位的染色体数目判定植物的染色体条数；

④采用分子标记鉴定法中的RAPD技术来鉴定突变体嵌合体的比例，鉴定筛选出多倍体纯系材料。