[发明专利]用于鉴别平贝母的特异性PCR鉴别引物及其应用在审
申请号: | 202010721055.7 | 申请日: | 2020-07-24 |
公开(公告)号: | CN111826460A | 公开(公告)日: | 2020-10-27 |
发明(设计)人: | 陈随清;杨灏;练从龙;张雪雨 | 申请(专利权)人: | 河南中医药大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 郑州天阳专利事务所(普通合伙) 41113 | 代理人: | 聂孟民 |
地址: | 450046 河南*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 鉴别 贝母 特异性 pcr 引物 及其 应用 | ||
本发明涉及用于鉴别平贝母的特异性PCR鉴别引物及其应用,可有效解决平贝母鉴别的特异性引物,并用于对平贝母进行准确鉴别的问题,所述的PCR鉴别引物,为上游引物PB‑Y1F:5'CGGGCGGACAATTTACTT 3'和下游引物:PB‑Y1R:5'AGATAGAGAGCGGGCGTC 3'两条单链DNA分子组成的引物对,正向引物3'端最末端碱基位于122位缺失位点上,PCR扩增产物的大小为186bp;本发明提供的引物对可有效用于对平贝母的鉴定,检测方法易操作,简单、快捷、准确率高,能够有效应用于大批量平贝母的鉴定工作,确保平贝母的质量和药用价值,有显著的经济和社会效益。
技术领域
本发明涉及医药,特别是一种用于鉴别平贝母的特异性PCR鉴别引物及其应用。
背景技术
平贝母为百合科贝母属多年生植物平贝母
中药材的准确快速鉴别是保证临床疗效和实验研究的重要环节之一,我国贝母属植物超过50种,15版中国药典共收录5大类贝母:川贝母、平贝母、伊贝母、浙贝母和湖北贝母,中国药典收录的川贝母的聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法仅能区分川贝母及其他贝母,在实际应用中无法对其他贝母进行准确鉴定,存在鉴定不完全的弊端。目前对于平贝母分子鉴定的相关研究还未见报道。
DNA条形码(DNA barcoding)技术作为最新的分子鉴定技术有着其他分子标记无法比拟的优势。Santhosh Kumardeng等开发了印度苦瓜的DNA条形码,并且基于条形码序列建立了苦瓜的真伪鉴别方法。Nicole Ollinger等基于DNA条形码技术,设计8对组合引物,通过一次PCR反应完成了对米根霉和黑曲霉等不同菌种的鉴定。Ke Ran等使用细胞色素c氧化酶亚基I(
发明内容
针对上述情况,为克服现有技术之不足,本发明之目的就是提供一种用于鉴别平贝母的特异性PCR鉴别引物及其应用,可有效解决平贝母鉴别的特异性引物,并用于对平贝母进行准确鉴别的问题。
本发明解决的技术方案是,一种用于鉴别平贝母的特异性PCR鉴别引物,为上游引物PB-Y1F:5' CGGGCGGACAATTTACTT 3'和下游引物:PB-Y1R:5'AGATAGAGAGCGGGCGTC 3'两条单链DNA分子组成的引物对,正向引物3'端最末端碱基位于122位缺失位点上,PCR扩增产物的大小为186bp;
一种用于鉴别平贝母的特异性PCR鉴别引物鉴别平贝母的应用方法,包括以下步骤:
(1)、平贝母总DNA的提取:按照天根快捷性植物基因组DNA提取试剂盒说明书要求提取总DNA,使用超微量紫外分光光度计对所提DNA的浓度和吸光度A260/A280进行检测,所得DNA 样本在-20℃ 条件下保存,备用;
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