[发明专利]复方氨基酸注射液中丙氨酰谷氨酰胺杂质的检测方法

权利要求书

1.一种复方氨基酸注射液中丙氨酰谷氨酰胺杂质的检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

（1）配制L-焦谷氨酸对照品溶液，配制对照品溶液时采用的溶剂为纯水；

（2）将适量复方氨基酸注射液注入填充了阳离子交换树脂的层析柱内，以超纯水为洗脱溶剂进行淋洗，收集洗脱液，即得供试品溶液；洗脱时保证氨基酸组分全部被阳离子树脂吸附去除，L-焦谷氨酸、环-（L-丙氨酰-谷氨酰胺）、L-焦谷氨酰-L-丙氨酸和环-（L-丙氨酰-谷氨酸）四种杂质全部被洗脱出来；

（3）确定高效液相色谱条件：

色谱柱：亲水改性的烷基硅烷化学键合硅胶柱，规格为50~250mm×2.1~4.6mm，填料粒径为1.7~5μm；

流动相：5～50mmol/L，磷酸氢二铵，pH1.9～2.1；

流速：0.9～1.1mL/min；

柱温：23～27℃；

检测波长：200～220nm；

进样体积：5～50μL；

（4）采用高效液相色谱法对L-焦谷氨酸对照品溶液及复方氨基酸注射液供试品溶液进行检测，记录相应色谱图；

（5）根据实验计算出环-（L-丙氨酰-谷氨酰胺）、L-焦谷氨酰-L-丙氨酸和环-（L-丙氨酰-谷氨酸）三种杂质对L-焦谷氨酸的相对保留时间及响应的校正因子，再根据L-焦谷氨酸对照品的峰面积计算供试品溶液中丙氨酰谷氨酰胺杂质含量。

2.根据权利要求1所述的复方氨基酸注射液中丙氨酰谷氨酰胺杂质的检测方法，其特征在于，步骤（3）中所述色谱柱的规格为4.6mm×250mm，粒径为5μm。

3.根据权利要求1所述的复方氨基酸注射液中丙氨酰谷氨酰胺杂质的检测方法，其特征在于，步骤（3）中所述流动相为浓度为10 mmol/L的 (NH₄)₂HPO₄，pH值为2.0。

4.根据权利要求1所述的复方氨基酸注射液中丙氨酰谷氨酰胺杂质的检测方法，其特征在于，步骤（3）中所述流速设置为1mL/min。

5.根据权利要求1所述的复方氨基酸注射液中丙氨酰谷氨酰胺杂质的检测方法，其特征在于，步骤（3）中所述柱温设置为25℃。

6.根据权利要求1所述的复方氨基酸注射液中丙氨酰谷氨酰胺杂质的检测方法，其特征在于，步骤（3）中所述检测波长设置为205nm。

7.根据权利要求1所述的复方氨基酸注射液中丙氨酰谷氨酰胺杂质的检测方法，其特征在于，步骤（3）中所述进样体积 设置为25μL。