[发明专利]一种预防和治疗创伤弧菌感染的卵黄抗体制备方法

权利要求书

1.一种预防和治疗创伤弧菌感染的卵黄抗体，其特征在于，所述卵黄抗体通过以下方法制备而成：

(1)从创伤弧菌感染患者的样本中分离创伤弧菌；

(2)制备创伤弧菌灭活菌体抗原并对产蛋母鸡进行免疫；

(3)收集免疫后的鸡蛋，从鸡蛋的卵黄中提取纯化卵黄抗体。

2.如权利要求1所述的卵黄抗体，其特征在于，所述步骤(1)从创伤弧菌感染患者的样本中分离创伤弧菌的具体步骤包括：创伤弧菌菌株的提取鉴定、分离纯化及培养保存。

3.如权利要求2所述的卵黄抗体，其特征在于，所述创伤弧菌菌株的提取鉴定、分离纯化及培养保存的具体操作如下：选取临床上创伤弧菌感染的患者的创面水泡液或组织渗液，将其稀释后进行涂板，培养过夜；挑取单一菌落离心纯化后，用质谱分析仪明确是否为创伤弧菌感染，将确定为创伤弧菌的菌株进行扩增培养。

4.如权利要求1所述的卵黄抗体，其特征在于，所述步骤(2)中制备创伤弧菌灭活菌体抗原具体步骤如下：使用甲醛灭活法对创伤弧菌进行灭活，制备全灭活菌体抗原。

5.如权利要求1所述的卵黄抗体，其特征在于，所述步骤(2)中对产蛋母鸡进行免疫的具体步骤如下：取抗原液在母鸡的翅基部三角肌或胸肌部位行肌肉或皮下注射，每两周接种一次。

6.如权利要求1所述的卵黄抗体，其特征在于，所述步骤(2)中还包括对产蛋母鸡进行免疫后产生的卵黄抗体的滴度检测。

7.如权利要求1所述的卵黄抗体，其特征在于，所述步骤(3)中从鸡蛋的卵黄中提取纯化卵黄抗体的具体操作如下：

(1)将蛋黄水混合溶解成匀浆，调节均浆pH值5.0±0.5，将酸化的匀浆溶液降温至2-8℃的条件下静置1-12小时；

(2)保持2-8℃环境下对均浆以转速5000-15000r/min高速离心，保留上清液；

(3)在上清液中加入硫酸铵，待盐析完全，经离心后收集沉淀，获得粗提物；

(4)将上述粗提物复溶于弱酸性缓冲液中，再将复溶液依次通过300kD、100kD的超滤膜进行浓缩，获得卵黄抗体混合浓缩液。

8.如权利要求7所述的卵黄抗体，其特征在于，所述硫酸铵的质量浓度为15％-45％。

9.如权利要求1所述的卵黄抗体，其特征在于，所述步骤(3)中从鸡蛋的卵黄中提取纯化卵黄抗体的步骤还包括检测卵黄抗体的效价及添加蛋白稳定剂。

10.如权利要求1～9任一项所述的创伤弧菌灭活菌体的卵黄抗体在制备预防或/和治疗创伤弧菌感染的试剂或药物中的用途。