[发明专利]从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法

权利要求书

1.从罗汉果提取渣中分离角鲨烯、谷甾醇和罗汉果黄素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）碱性低碳醇提取：将罗汉果提取渣破碎，加入碱性低碳醇/水溶液，室温避光搅拌提取，过滤，得提取滤液；

所述罗汉果提取渣是指罗汉果鲜果或干果用水提取罗汉果甜苷之后的废渣，包括罗汉果果籽和罗汉果果壳；

所述碱性低碳醇/水溶液中的低碳醇为甲醇、乙醇和异丙醇中的一种或几种，低碳醇的体积分数为40%～99%；每1kg罗汉果提取渣加入5～10L碱性低碳醇/水溶液；

所述碱性低碳醇中的碱为氢氧化钠或氢氧化钾，所述碱性低碳醇中碱的质量百分比浓度为0.5%～2%，所述室温避光搅拌提取的时间为6～8小时；

（2）粗提物的干燥：将步骤（1）所得提取滤液用酸中和，减压浓缩至无醇，往浓缩液中加入层析硅胶，搅拌均匀，真空干燥至恒重，得粗提物拌样硅胶；

（3）角鲨烯的分离和纯化：将步骤（2）所得粗提物拌样硅胶投入二氧化碳超临界萃取器中，通入含有夹带剂的二氧化碳气体进行萃取，萃取结束后，降温减压至常温常压，得初萃物；初萃物先用有机溶剂稀释溶解，再用碱水反萃取，将有机溶剂层用水洗至中性，分液，有机层加入硅藻土，搅拌，过滤，减压浓缩至无溶剂，得角鲨烯成品和经超临界萃取后的拌样硅胶；

所述萃取的温度为35～45℃，压力为20～28MPa，时间为1～2小时；所述夹带剂为甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚、环己烷、正己烷和水中的一种或几种，所述夹带剂的加入量为罗汉果提取渣的0.01%～0.1%；

（4）硅胶柱分离：取步骤（3）经超临界萃取后的拌样硅胶，投入硅胶层析柱中，依次用洗脱剂I和洗脱剂II对硅胶柱进行洗脱，分别收集洗脱液I和洗脱液II；

所述洗脱剂I是体积比为9～10:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶液，洗脱剂I的用量为3～5BV，使用洗脱剂I洗脱的流速为0.5～1.0 BV/小时；所述洗脱剂II是体积比为6～8:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶液，洗脱剂II的用量为3～5BV，使用洗脱剂II洗脱的流速为0.5～2.0 BV/小时；

（5）谷甾醇的分离和纯化：将洗脱液I减压浓缩至无溶剂，干燥，得谷甾醇粗品；将谷甾醇粗品用脂溶性有机溶剂溶解，加入硅藻土，搅拌回流，趁热过滤，浓缩，将浓缩液冷却，搅拌析晶，抽滤，滤饼干燥，得谷甾醇成品；

所述浓缩液的固形物浓度为10%～20%，所述冷却的温度为5～10℃，所述搅拌的速度为20～60 r/min，所述析晶的时间为8～24小时；

（6）罗汉果黄素的分离和纯化：将洗脱液II加入中性氧化铝，搅拌回流，趁热过滤，浓缩，干燥，得罗汉果黄素成品。

2.根据权利要求1所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯、谷甾醇和罗汉果黄素的方法，其特征在于，步骤（2）中，所述的酸为无机酸。

3.根据权利要求2所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯、谷甾醇和罗汉果黄素的方法，其特征在于，所述无机酸为盐酸或硫酸。

4.根据权利要求1～3任一项所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯、谷甾醇和罗汉果黄素的方法，其特征在于，步骤（2）中，每1kg罗汉果提取渣加入0.1～0.2L层析硅胶。

5.根据权利要求1～3任一项所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯、谷甾醇和罗汉果黄素的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述有机溶剂为石油醚、乙醚、正己烷、环己烷、6#溶剂油、120#溶剂油、乙酸乙酯中的一种或几种，每千克湿罗汉果提取渣中加入0.05～2L有机溶剂。

6.根据权利要求4所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯、谷甾醇和罗汉果黄素的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述有机溶剂为石油醚、乙醚、正己烷、环己烷、6#溶剂油、120#溶剂油、乙酸乙酯中的一种或几种，每千克湿罗汉果提取渣中加入0.05～2L有机溶剂。

7.根据权利要求1～3任一项所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯、谷甾醇和罗汉果黄素的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述硅藻土的用量为湿罗汉果提取渣重量的1‰～5‰。