[发明专利]一种用于改善免疫功能的穴位注射剂

权利要求书

1.一种用于改善免疫功能的穴位注射剂，其特征在于包括富血小板血浆和外周血单核细胞。

2.如权利要求1所述的一种用于改善免疫功能的穴位注射剂，其特征在于富血小板血浆与外周血单核细胞的体积比为1-2:1-2。

3.如权利要求1所述的一种用于改善免疫功能的穴位注射剂，其特征在于所述富血小板血浆的制备方法包括：

（1）收集经3%-10%抗凝剂处理的抗凝全血；

（2）将步骤（1）得到的抗凝全血用水平离心机离心，离心条件为200×g，10分钟，4℃，收集上清液A，剩下部分为B；

（3）用生理盐水以1：1-14的比例稀释B，然后以200×g，10分钟，4℃的离心条件离心，收集上清液C；

（4）混合上清液A和上清液C，混合均匀后置于4℃冰箱25分钟，得到混合液D；

（5）将混合液D静置后以200×g，5分钟，4℃离心，收集上清液制得富血小板血浆。

4.如权利要求1所述的一种用于改善免疫功能的穴位注射剂，其特征在于所述外周血单核细胞的制备方法包括：

（1）无菌条件下采集经3%-10%抗凝剂处理的抗凝全血；

（2）与Hank’s液体积比1:1充分混合，缓慢加入淋巴细胞分离液上，水平离心转速2000r/min下离心30min，取上、中层界面处白色云雾层狭窄带，即获得含有血小板的外周血单核细胞液；

（3）吸取单个核细胞，置入另一离心管中，加入5-20倍体积的Hank’s液，水平离心转速1500 r/min下离心10 min，洗涤细胞2 次，低渗裂解红细胞，得到纯PBMCs液，显微镜计数。

5.如权利要求3或4所述的一种用于改善免疫功能的穴位注射剂，其特征在于所述抗凝剂包括枸橼酸钠。

6.富血小板血浆和外周血单核细胞混合在制备改善免疫功能的药物上的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于富血小板血浆与外周血单核细胞混合的体积比为1-2:1-2。

8.如权利要求6所述的应用，其特征在于所述富血小板血浆的制备方法包括：

（1）收集经3%-10%抗凝剂处理的抗凝全血；

（2）将步骤（1）得到的抗凝全血用水平离心机离心，离心条件为200×g，10分钟，4℃，收集上清液A，剩下部分为B；

（3）用生理盐水以1：1-14的比例稀释B，然后以200×g，10分钟，4℃的离心条件离心，收集上清液C；

（4）混合上清液A和上清液C，混合均匀后置于4℃冰箱25分钟，得到混合液D；

（5）将混合液D静置后以200×g，5分钟，4℃离心，收集上清液制得富血小板血浆。

9.如权利要求6所述的应用，其特征在于所述外周血单核细胞的制备方法包括：

（1）无菌条件下采集经3%-10%抗凝剂处理的抗凝全血；

（2）与Hank’s液体积比1:1充分混合，缓慢加入淋巴细胞分离液上，水平离心转速2000r/min下离心30min，取上、中层界面处白色云雾层狭窄带，即获得含有血小板的外周血单核细胞液；

（3）吸取单个核细胞，置入另一离心管中，加入5-20倍体积的Hank’s液，水平离心转速1500 r/min下离心10 min，洗涤细胞2 次，低渗裂解红细胞，得到纯PBMCs液，显微镜计数。

10.如权利要求8或9所述的应用，其特征在于所述抗凝剂包括枸橼酸钠。