[发明专利]一种用于改善免疫功能的穴位注射剂

说明书

一种用于改善免疫功能的穴位注射剂，属于注射用药物注射液及其制备方法技术领域。该穴位注射剂包括富血小板血浆和外周血单核细胞。富血小板血浆与外周血单核细胞的体积比为1‑2:1‑2。本发明穴位注射剂采用PBMC联合PRP提升免疫力的方法，使细胞吞噬百分率明显增加，NK细胞活性明显增强，具有诱导淋巴细胞增值转化的能力，能够改善机体的免疫功能。

技术领域

本发明属于注射用药物注射液及其制备方法技术领域，具体涉及一种用于改善免疫功能的穴位注射剂。

背景技术

富血小板血浆(platelet-richplasma,PRP)是指全血经过离心、分离而得到的高度浓缩的产物,其血小板水平通常为正常全血的4～5倍以上。PRP中含有血小板源生长因子、β转化生长因子、血管内皮生长因子、表皮生长因子、类胰岛素生长因子、成纤维细胞生长因子等各种生长因子。目前已有临床结果表明，注射PRP可以治疗骨关节炎，促进血管生成，外科修复等。

外周血单核细胞（PBMC）包括淋巴细胞、单核细胞和巨噬细胞，它们在提取PRP时从血液中一同被清除。目前已有较为成熟的单核细胞的提取技术。

目前通过穴位注射提升免疫力的方法有很多，也有通过PBMC学位注射的临床应用，但未有对PBMC联合PRP提升免疫力的研究。我们研究发现，将PBMC与PRP混合后能更好的通过穴位注射激活自身免疫活性，效果优于PBMC、PRP。

现有文献《含PBMC自体PRP在四肢软组织非急性感染创面中的临床应用研究》转化医学电子杂志,2018,5(01):17-22出版，将含PBMC的PRP进行临床应用，该研究采用经典的PRP制备方法，在操作过程中保留了部分PBMC。然而，该方法未采用PBMC的标准制备方法，无法得到足够数量和纯度的PBMC，同时降低了PRP的纯度，并且难以进行标准化制备和质量控制。本发明分别采用经典的PBMC和PRP制备方法，通过独立制备的方法得到高质量的PBMC和PRP，再进行混合应用，具有上述研究更高质量的PBMC和PRP，能有效进行标准化和质量控制。

发明内容

针对上述现有技术中存在的问题，本发明设计提供一种用于改善免疫功能的穴位注射剂。采用PBMC联合PRP提升免疫力的方法，取得了突出的效果。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种用于改善免疫功能的穴位注射剂，其特征在于包括富血小板血浆和外周血单核细胞。

所述的一种用于改善免疫功能的穴位注射剂，其特征在于富血小板血浆与外周血单核细胞的体积比为1-2:1-2。

所述的一种用于改善免疫功能的穴位注射剂，其特征在于所述富血小板血浆的制备方法包括：

（1）收集经3%-10%抗凝剂处理的抗凝全血；

（2）将步骤（1）得到的抗凝全血用水平离心机离心，离心条件为200×g，10分钟，4℃，收集上清液A，剩下部分为B；

（3）用生理盐水以1：1-14的比例稀释B，然后以200×g，10分钟，4℃的离心条件离心，收集上清液C；

（4）混合上清液A和上清液C，混合均匀后置于4℃冰箱25分钟，得到混合液D；

（5）将混合液D静置后以200×g，5分钟，4℃离心，收集上清液制得富血小板血浆。

所述的一种用于改善免疫功能的穴位注射剂，其特征在于所述外周血单核细胞的制备方法包括：

（1）无菌条件下采集经3%-10%抗凝剂处理的抗凝全血；

（2）与Hank’s液体积比1:1充分混合，缓慢加入淋巴细胞分离液上，水平离心转速2000r/min下离心30min，取上、中层界面处白色云雾层狭窄带，即获得含有血小板的外周血单核细胞液；