[发明专利]一种抑制黑色素合成的天然成分及在化妆品中的应用

权利要求书

1.一种天然成分小球藻多糖的美白用途，该小球藻多糖通过如下步骤制备：

步骤S1，提取：将小球藻粉与蒸馏水按照液料质量比为20:1混匀，超声30min后添加1.45%复合酶并调pH为5，酶解30min后灭酶；使溶液置于70℃条件下浸提4h，4500r/min离心15min，取上清液与3倍体积乙醇混合并于4℃过夜，离心收集醇沉物，蒸馏水复溶后浓缩至原体积的1/2；其中，所述复合酶由纤维素酶和木瓜蛋白酶按1:1组成；

步骤S2，脱蛋白：向浓缩液中加入1/2体积的Sevage试剂，剧烈震荡20min，移入分液漏斗中静置20min，弃去中间与下层物质，多次重复上述工艺至观察到无明显的中间蛋白层；其中，所述Sevage试剂由氯仿和正丁醇按体积比4:1组成；

步骤S3，除杂：脱除蛋白的多糖溶液浓缩并去除有机试剂后，透析48h，并间隔12h更换一次蒸馏水，从而除去样液中的盐类及小分子物质，再浓缩、冻干，得粗多糖；

步骤S4，阴离子交换柱层析：将经预处理的50g DEAE-Sepharose Fast Flow用玻璃棒引流入层析柱，去离子水以12mL/min流速冲柱5min，再调流速至8mL/min，平衡10h以上；将10mL 5mg/mL粗多糖过0.45µm水系一次性针头滤器；上样后，用去离子水洗脱，流速2mL/min，收集200mL，透析、浓缩、冻干，即得；其中，所述层析柱的规格为1.6cm×30cm。