[发明专利]一种抑制黑色素合成的天然成分及在化妆品中的应用

说明书

本发明公开了一种抑制黑色素合成的天然成分及在化妆品中的应用。本发明发现，现有技术公开的从小球藻中分离得到的纯化多糖F1具有酪氨酸酶抑制活性，还可以通过抑制黑色素合成关键蛋白MITF、TYR的表达抑制黑色素的合成，最终导致细胞中的黑色素含量降低。可见，纯化多糖F1具有美白活性，具有开发成美白化妆品(包括但不限于洗面奶、面霜、手霜、乳液、面膜等)的前景。

技术领域

本发明属于化妆品领域，涉及一种抑制黑色素合成的天然成分及在化妆品中的应用。

背景技术

黑色素是一种由细胞本身所合成、分泌的不溶于水溶于碱性溶液的生物色素，属于蛋白质衍生物，可以吸收紫外线从而保护肌肤免受紫外线所带来的各种损伤，包括光老化、炎症和癌症等。但黑色素的过度合成或者合成失常，譬如雀斑和白癜风等，则会对面容产生一定影响，甚至给患者带来心理和精神压力，严重影响患者的生活状态。黑色素是由神经嵴细胞发育而来的位于表皮基底细胞层中的黑色素细胞所合成，再通过树突结构运输至角质形成细胞中并在其中进行重新排列分布。因此黑色素颗粒会随着角质形成细胞的分化而向上迁移，最终落于角质层中，而角质层中的黑色素构成了肉眼可见的色素沉积(参考文献：黑色素的合成与美白产品的研究进展，华东师范大学学报·自然科学版，2016年3月)。

酪氨酸酶家族即TYR、TRP1和TRP2在黑色素合成和色素沉积中起着非常重要的作用。TYR是一种含铜离子的跨膜糖蛋白，其基因在细胞核中转录成mRNA之后，进入到细胞质中，在核糖体上经酶催化作用后翻译成肽链。然后在内质网上经过一系列的修饰如糖基化修饰，再进入高尔基体，最终转移至黑素小体中，成为有活性的TYR，之后便可以催化底物酪氨酸变成多巴，从而开启黑色素的合成(参考文献：黑色素的合成与美白产品的研究进展，华东师范大学学报·自然科学版，2016年3月)。

因此，抑制黑色素的合成是美白的重要方法，而抑制酪氨酸酶活性又是抑制黑色素合成最常用的手段。市面上大多数美白化妆品都是围绕这个思路实现的美白效果。

小球藻(Chlorella)是绿球藻目中的常见植物，属绿藻门，小球藻属，又称绿藻，它是地球上最早的生命形式之一，也是东方的一种替代药物，更是日本、中国等亚洲国家的传统食品。多糖是小球藻中重要的营养物质，占小球藻粉的10％～20％，具有抗衰老、抗氧化及增强免疫等生物活性功能。史瑞琴等从小球藻中分离得到三种高均一度的纯化多糖F1、F2、F3(小球藻多糖的分离纯化及理化性质，食品科学，2019年9月)，目前没有纯化多糖F1在抑制黑色素合成、抑制酪氨酸酶活性和美白方面的研究。

发明内容

本发明是为了提供一种抑制黑色素合成的天然成分及在化妆品中的应用。

本发明技术方案如下：

一种天然成分小球藻多糖，通过如下步骤制备：

步骤S1，提取：将小球藻粉与蒸馏水按照液料质量比为20:1混匀，超声30min后添加1.45％复合酶(纤维素:木瓜蛋白酶＝1:1)并调pH为5，酶解30min后灭酶；使溶液置于70℃条件下浸提4h，4500r/min离心15min，取上清液与3倍体积乙醇混合并于4℃过夜，离心收集醇沉物，蒸馏水复溶后浓缩至原体积的1/2；

步骤S2，脱蛋白：向浓缩液中加入1/2体积的Sevage试剂(氯仿:正丁醇＝4:1，v/v)，剧烈震荡20min，移入分液漏斗中静置20min，弃去中间与下层物质，多次重复上述工艺至观察到无明显的中间蛋白层；

步骤S3，除杂：脱除蛋白的多糖溶液浓缩并去除有机试剂后，透析48h，并间隔12h更换一次蒸馏水，从而除去样液中的盐类及小分子物质，再浓缩、冻干，得粗多糖；