[发明专利]双重实时荧光定量PCR鉴定布鲁氏菌S2疫苗株的方法及其使用的成套试剂

权利要求书

1.鉴定布鲁氏菌S2疫苗株的成套试剂，为成套试剂2或成套试剂1；

所述成套试剂2由引物Bru-F1、引物Bru-R1、探针Bru-Probe1、引物S2-F2、引物S2-R2和探针S2-Probe2组成；

所述成套试剂1由所述引物Bru-F1、所述引物Bru-R1、所述探针Bru-Probe1、引物S2-F1、引物S2-R1和探针S2-Probe1组成；

所述引物Bru-F1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；

所述引物Bru-R1的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；

所述探针Bru-Probe1的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；

所述引物S2-F2的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；

所述引物S2-R2的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示；

所述探针S2-Probe2的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示；

所述引物S2-F1的核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示；

所述引物S2-R1的核苷酸序列如SEQ ID NO:8所示；

所述探针S2-Probe1的核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示；

所述探针Bru-Probe1的5′末端具有荧光报告基团甲，3′末端具有荧光淬灭基团甲；

所述探针S2-Probe2的5′末端具有荧光报告基团乙，3′末端具有荧光淬灭基团乙；

所述探针S2-Probe1的5′末端具有荧光报告基团丙，3′末端具有荧光淬灭基团丙。

2.权利要求1所述的成套试剂在制备用于鉴定或辅助鉴定布鲁氏菌S2疫苗株的试剂盒中的应用。

3.权利要求1所述的成套试剂的应用，为e2）或e3）：

e2）鉴定或辅助鉴定待测样品中是否含有或疑似含有布鲁氏菌S2疫苗株；

e3）鉴定或辅助鉴定待测菌是否为或疑似为布鲁氏菌S2疫苗株；

所述应用用于非疾病的诊断与治疗。

4.含有权利要求1所述的成套试剂的试剂盒。

5.权利要求4所述试剂盒的应用，为e2）或e3）：

e2）鉴定或辅助鉴定待测样品中是否含有或疑似含有布鲁氏菌S2疫苗株；

e3）鉴定或辅助鉴定待测菌是否为或疑似为布鲁氏菌S2疫苗株；

所述应用用于非疾病的诊断与治疗。

6.一种鉴定待测样品是否含有或疑似含布鲁氏菌S2疫苗株的方法，包括如下步骤：以待测样品的核酸为模板，以权利要求1所述的成套试剂进行双重实时荧光定量PCR，然后进行如下评判：如果检出两种荧光信号，则待测样品中含有或疑似含有非布鲁氏菌S2疫苗株的布鲁氏菌；如果检出一种荧光信号，则待测样品中含有或疑似含有布鲁氏菌S2疫苗株；如果未检出荧光信号，则待测样品中不含有或疑似不含有布鲁氏菌；

所述方法用于非疾病的诊断与治疗。

7.一种鉴定待测样品是否含有或疑似含布鲁氏菌S2疫苗株的方法，包括如下步骤：以待测样品的核酸为模板，以权利要求1所述的成套试剂进行双重实时荧光定量PCR，然后进行如下评判：如果获得2条S形扩增曲线，则待测样品中含有或疑似含有非布鲁氏菌S2疫苗株的布鲁氏菌；如果获得1条S形扩增曲线，则待测样品中含有或疑似含有布鲁氏菌S2疫苗株；如果不能获得S形扩增曲线，则待测样品中不含有或疑似不含有布鲁氏菌；

所述方法用于非疾病的诊断与治疗。

8.一种鉴定待测菌是否为或疑似为布鲁氏菌S2疫苗株的方法，包括如下步骤：以待测菌的核酸为模板，以权利要求1所述的成套试剂进行双重实时荧光定量PCR，然后进行如下评判：如果检出两种荧光信号，则待测菌为或疑似为非布鲁氏菌S2疫苗株的布鲁氏菌；如果检出一种荧光信号，则待测菌为或疑似为布鲁氏菌S2疫苗株；如果未检出荧光信号，则待测菌为或疑似为非布鲁氏菌；

所述方法用于非疾病的诊断与治疗。

9.一种鉴定待测菌是否为或疑似为布鲁氏菌S2疫苗株的方法，包括如下步骤：以待测菌的核酸为模板，以权利要求1所述的成套试剂进行双重实时荧光定量PCR，然后进行如下评判：如果获得2条S形扩增曲线，则待测菌为或疑似为非布鲁氏菌S2疫苗株的布鲁氏菌；如果获得1条S形扩增曲线，则待测菌为或疑似为布鲁氏菌S2疫苗株；如果不能获得S形扩增曲线，则待测菌为或疑似为非布鲁氏菌；

所述方法用于非疾病的诊断与治疗。