[发明专利]一种抗肿瘤活性肽、合成方法及应用

说明书

本发明属于生物技术领域，公开了一种抗肿瘤活性肽、合成方法及应用，所述活性肽的结构为：环‑(Leu‑Pro‑Pro‑(D‑Phe)‑Ile‑Pro‑(D‑Phe)‑Val)。合成方法包括以下步骤：1)采用树脂与氨基酸进行偶联反应，使树脂上偶联有直链肽；2)向树脂中加入切割液反应，收集反应后溶液，向所述溶液中滴加DIEA调节pH值呈中性，得到直链肽的粗品溶液；3)将直链肽粗品溶液滴加入环肽反应体系中，合成环肽。本发明通过两个D‑苯丙氨酸来替换原Samoamide A环肽中的两个苯丙氨酸，并通过合适的固相合成方法得到基于的Samoamide A的衍生物Samoamide C，制备的Samoamide C针对DPP‑4酶活抑制率以及对肿瘤细胞毒性均得到显著的提高，体现出更优异的抗肿瘤活性。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体的涉及一种抗肿瘤活性肽、合成方法及应用。

背景技术

多肽类药物因其具有分子量小，特异性高，低副作用等，被认为是良好的治疗恶性肿瘤的药物而受到广泛关注。Samoamide A[-(Leu-Pro-Pro-Phe-Ile-Pro-Phe-Val)-]是从海洋藻类中天然提取的一条环肽，并且对肿瘤细胞具有良好的毒性效果。但是天然提取的Samoamide A提取产率较低且活性较差，无法规模化生产及应用，因此需要发明一种固相合成的方法使提高产率，同时能够提高其活性，使其得到更广泛的应用。

经检索，针对Samoamide A的合成方法，现有技术已有相关的申请案公开，如中国专利申请号为201810931188.X，公开日期为2019年1月8日的申请案公开了一种藻青菌环八肽Samoamide A的制备方法，包括以下步骤：(1)在耦合试剂下，Fmoc-Val-OH与树脂固相载体偶联，得FmocVal-树脂；(2)利用脱保护剂脱除Fmoc基团；(3)在缩合剂和活化试剂作用下，将具有N端Fmoc保护的氨基酸偶联到树脂上；其中，所述具有N端Fmoc保护的氨基酸依次为Fmoc-Phe-OH、FmocPro-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-ProOH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Leu-OH；(4)重复(2)、(3)步骤，得到全肽树脂；(5)利用切割试剂将肽链从肽树脂上脱下，使之沉淀得直链肽粗品；(6)取直链肽，利用缩合剂环合直链肽(7)分离纯化，得Samoamide A。