[发明专利]维生素B2的检测方法在审
申请号: | 202010740550.2 | 申请日: | 2020-07-28 |
公开(公告)号: | CN111812260A | 公开(公告)日: | 2020-10-23 |
发明(设计)人: | 魏斌;贾永娟;许丽;倪君君 | 申请(专利权)人: | 北京和合医学诊断技术股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/06 | 分类号: | G01N30/06;G01N30/74 |
代理公司: | 济南信达专利事务所有限公司 37100 | 代理人: | 李世喆 |
地址: | 101111 北京市北京经济技术开发区经*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 维生素 b2 检测 方法 | ||
1.维生素B2的检测方法,其特征在于,包括:
制备至少三种浓度的标准溶液,其中,所述标准溶液为具有维生素B2的溶液;
利用高效液相色谱仪在预设的检测条件下分别检测每一种所述标准溶液,获得每一种所述标准溶液对应的第一检测结果;
根据各个所述第一检测结果、所述标准溶液中维生素B2的浓度,拟合维生素B2的标准曲线方程;
对待处理样品进行离心处理,取离心后的第一上清液;
向所述第一上清液内加入稀释液,涡旋混匀,顺次加入沉淀蛋白试剂,高速离心,取离心后的第二上清液作为待测样品;
利用高效液相色谱仪在预设的检测条件下检测所述待测样品,获得所述待测样品的第二检测结果;
基于所述标准曲线方程和所述第二检测结果,得到所述待测样品中维生素B2的浓度。
2.根据权利要求1所述的维生素B2的检测方法,其特征在于,
所述检测条件,包括:
长度为100mm、内径为2.1mm以及填料粒径为5μm的色谱柱;
洗脱流动相为20mmol/L磷酸二氢钠的水溶液和甲醇;
柱温为28℃;
流速为0.6mL/min。
3.根据权利要求2所述的维生素B2的检测方法,其特征在于,
所述洗脱流动相采用等度洗脱;
20mmol/L磷酸二氢钠的水溶液与甲醇的体积比为:77:23。
4.根据权利要求1所述的维生素B2的检测方法,其特征在于,
所述标准曲线方程的两个变量分别为:所述第一检测结果中维生素B2的色谱峰面积和所述标准溶液中维生素B2的浓度。
5.根据权利要求1所述的维生素B2的检测方法,其特征在于,
所述检测条件还包括:检测器的激发波长为435nm,发射波长为525nm。
6.根据权利要求1所述的维生素B2的检测方法,其特征在于,
所述沉淀蛋白试剂包括:三氯乙酸。
7.根据权利要求1所述的维生素B2的检测方法,其特征在于,
所述第一上清液与所述沉淀蛋白试剂的体积比为:1:6-1:12。
8.根据权利要求1至7中任一所述的维生素B2的检测方法,其特征在于,
所述向第一上清液内加入沉淀蛋白试剂,高速离心,取第二上清液作为待测样品,包括:
向所述第一上清液加入稀释液,在转速为1000-2000rpm下涡旋混匀0.5-1.0min,再加入沉淀蛋白试剂,在转速为1000-2000rpm下涡旋混匀2-5min,并在转速为10000-15000rpm下高速离心3-6min,取第二上清液作为待测样品。
9.根据权利要求8所述的维生素B2的检测方法,其特征在于,
所述稀释液包括:蒸馏水。
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