[发明专利]维生素B2的检测方法

说明书

本发明提供了维生素B2的检测方法，包括：制备至少三种浓度的标准溶液，其中，标准溶液为具有维生素B2的溶液；利用高效液相色谱仪在预设的检测条件下分别检测每一种标准溶液，获得每种标准溶液的第一检测结果；根据各个第一检测结果、标准溶液中维生素B2的浓度，拟合维生素B2的标准曲线方程；对待处理样品进行离心处理，取离心后的第一上清液；向第一上清液内加入稀释液，涡旋混匀，顺次加入沉淀蛋白试剂，高速离心，取离心后的第二上清液作为待测样品；利用高效液相色谱仪在预设的检测条件下检测待测样品，获得待测样品的第二检测结果；基于标准曲线方程和第二检测结果，得到待测样品中维生素B2的浓度。本方案能够缩短样品检测时间。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，特别涉及维生素B2的检测方法。

背景技术

维生素B₂对于体内糖类、脂类和氨基酸的新陈代谢是必须的，也是一种细胞抗氧化剂，它作为辅酶通过两次连续的单电子传递来实现这些功能。

目前，检测样品中维生素B₂含量通常采用的方法为高效液相色谱法。而高效液相色谱法检测维生素B₂通常需要对待测样品进行较复杂的前处理，耗费时间较多，从而导致样品检测时间较长。

发明内容

本发明提供了维生素B2的检测方法，能够缩短样品检测时间。

为了解决上述问题，本发明实施例提供了维生素B2的检测方法，包括：

制备至少三种浓度的标准溶液，其中，所述标准溶液为具有维生素B2的溶液；

利用高效液相色谱仪在预设的检测条件下分别检测每一种所述标准溶液，获得每一种所述标准溶液对应的第一检测结果；

根据各个所述第一检测结果、所述标准溶液中维生素B2的浓度，拟合维生素B2的标准曲线方程；

对待处理样品进行离心处理，取离心后的第一上清液；

向所述第一上清液内加入向所述第一上清液内加入稀释液，涡旋混匀，顺次加入沉淀蛋白试剂，高速离心，取离心后的第二上清液作为待测样品；

利用高效液相色谱仪在预设的检测条件下检测所述待测样品，获得所述待测样品的第二检测结果；

基于所述标准曲线方程和所述第二检测结果，得到所述待测样品中维生素B2的浓度。

需要说明的是，第一上清液为血清或血浆。

优选地，

所述检测条件，包括：

长度为100mm、内径为2.1mm以及填料粒径为5μm的色谱柱；

洗脱流动相为20mmol/L磷酸二氢钠的水溶液和甲醇；

柱温为28℃；

流速为0.6mL/min。

具体地，色谱柱包括Waters Xbridge-C₁₈，5μm，2.1mm×100mm。

优选地，

所述洗脱流动相采用等度洗脱；

20mmol/L磷酸二氢钠的水溶液与甲醇的体积比为：77:23。

具体地，洗脱时间为3.5min。

优选地，

所述标准曲线方程的两个变量分别为：所述第一检测结果中维生素B2的色谱峰面积和所述标准溶液中维生素B2的浓度。