[发明专利]一种瘘洞修补制剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种瘘洞修补制剂，通过以下方法制备：(一)脂肪干细胞的制备；(二)脂肪干细胞在异体真皮上的生长及培养：将脂肪干细胞接种到异种真皮上，生长7～14天；所述异种真皮选自脱细胞猪皮或脱细胞羊膜；(三)自体PRP的制备(四)瘘洞修补制剂的制备：将PRP与交联的玻尿酸进行充分混合；将混合后的玻尿酸‑PRP混合物均匀涂抹在生长有脂肪干细胞的异种真皮上，厚度为2mm；将涂有混合物的异种真皮卷成柱状，即得瘘洞修补制剂。本发明的瘘洞修补制剂，能够有效对瘘洞进行修复，可以减少病人痛苦，缩短愈合时间，肛门失禁也有所减轻。

技术领域

本发明涉及一种瘘洞修补制剂及其制备方法，属于再生医学技术领域。

背景技术

肛瘘(analfistula)是指肛管周围的肉芽肿性管道，由内口、瘘管、外口三部分组成。内口常位于肛窦，多为一个；外口在肛周皮肤上，可为一个或多个，经久不愈或间歇性反复发作，任何年龄都可发病，多见于青壮年男性。大部分肛瘘由直肠肛管周围脓肿引起，脓肿自行破溃或切开引流处形成外口，位于肛周皮肤。由于外口生长较快，脓肿常假性愈合,导致脓肿反复发作破溃或切开，形成多个瘘管和外口，使单纯性肛瘘成为复杂性肛瘘。瘘外口流出少量脓性、血性、黏液性分泌物为主要症状。由于分泌物的刺激，使肛门部潮湿，瘙痒,有时形成湿疹。当外口愈合，瘘管中有脓肿形成时，可感到明显疼痛，同时可伴有发热、寒战、乏力等全身感染症状，脓肿穿破或切开引流后，症状缓解。上述症状的反复发作是肛瘘的临床特点。肛瘘极少自愈,不治疗会反复发作直至直肠肛管周围脓肿。

目前治疗肛瘘的方法有堵塞法、手术法等：1.堵塞法：0.5％甲硝唑、生理盐水冲洗瘘管后，用生物蛋白胶自外口注入。治愈率较低，约为25％。该方法无创伤无痛苦，对单纯性肛瘘可采用。使用异体真皮填塞后瘘管内部需要6个月左右的重建，期间若管理不当，仍然可能出现复发感染情况。此外,还有少部分对象可能因免疫排斥反应导致失败。也有报道称治愈率和复发率无明显改善。2.手术法：肛瘘手术是较为有效的肛瘘治疗方法，可供选择的术式较多，治疗以切开挂线术为主，适合复杂的高位肛瘘，但复发率、并发症发生率较高，且手术创伤较大，患者痛苦感较强，术后容易出现肛肠功能障碍。

对于慢性瘘道患者而言，其需要长期住院与换药，医护人员在多次对其创伤部位进行清洁的情况下，容易使创面愈合时间较长，治疗效果不佳；此外慢性难愈合伤口部位还会出现伤口感染或者坏死组织，伤口部位的血液循环能力较差，修复组织细胞容易出现过度凋亡的症状，进而病人的细胞膜受体结构便会发生变化。在运用传统方法对患者创伤部位进行处理的时候，仅能对坏死组织进行清理，并不能达到解决创伤伤口愈合的效果；医护人员对患者血供重建则更难以实现。

慢性难愈性创面目前尚无明确定义，认为因各种原因形成的经1个月以上治疗未能愈合也无明显愈合倾向甚至加重的创面即可称为慢性难愈性创面。随着人们生活水平的提高，糖尿病、高龄及复杂创伤的增多，慢性难愈性创面的发病率也逐年提高。这种疾病明显降低患者的生活质量、增加医疗费用，严重时甚至威胁患者生命。目前治疗慢性难愈性创面方法单一，疗效欠佳，时间成本和费用高昂。

血小板是循环在血液中的一种没有细胞核的颗粒细胞。血小板以非活化形式在机体中循环,直到它们接触到内皮细胞的缺损区或遇到凝血级联反应才被活化。活化后的血小板黏附于内皮细胞的缺损部位,发生变形,释放颗粒内容物,并相互黏附形成聚合物,限制血液流失。活化的血小板也表达和释放一些分子,这些分子能通过激活白细胞和内皮细胞来刺激局部的炎症反应。目前已明确血小板的功能不仅仅是止血，血小板与许多病理过程关联,包括宿主防御反应、炎症性关节炎以及肿瘤生长和转移。

PRP是经过离心，从全血中得到的富含血小板的浓缩物,含有30余种高浓度的生长因子,并且可以从自体外周血中提取,自体应用无免疫排斥反应,已经被广泛应用于骨科、整形美容科、烧伤科、口腔科等组织工程研究领域。PRP来源于外周抗凝血,制备步骤主要包括外周血的采集、抗凝和二次离心。PRP中血小板浓度不是越高越好，基础水平的2.5倍左右可以发挥最大功能，否则具有相反的抑制作用。

发明内容