[发明专利]VIPERIN功能缺失的细胞系的构建方法及其应用在审
| 申请号： | 202010743689.2 | 申请日： | 2020-07-29 |
| 公开（公告）号： | CN111849987A | 公开（公告）日： | 2020-10-30 |
| 发明（设计）人： | 陈瑞爱;黄梅;刘定祥;向程威;叶俊贤;董楠;杨小云 | 申请（专利权）人： | 华农（肇庆）生物产业技术研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/90;C12N5/10;C12R1/91 |
| 代理公司： | 广州市科丰知识产权代理事务所(普通合伙) 44467 | 代理人： | 龚元元 |
| 地址： | 526060 广东省肇庆市高新区创业路5*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | viperin 功能 缺失 细胞系 构建 方法 及其 应用 | ||
1.用于特异性靶向DF-1细胞VIPERIN基因的sgRNA，其特征在于，所述sgRNA序列如SEQID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
2.用于CRISPR/Cas9编辑DF-1细胞VIPERIN基因的质粒，其特征在于，所述质粒含有sgRNA，所述如sgRNA的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
3.根据权利要求2所述的质粒，其特征在于，所述质粒由所述sgRNA和PX459载体连接得到。
4.一种VIPERIN功能缺失的细胞系的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)构建用于编辑VIPERIN基因的质粒；
2)将用于编辑VIPERIN基因的质粒转染至DF-1宿主细胞，得到转染细胞；
3)将转染细胞培养筛选得到VIPERIN功能缺失的细胞系；
其中，所述用于编辑VIPERIN基因的质粒中含有如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的sgRNA。
5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述sgRNA与PX459载体连接，得到所述用于编辑VIPERIN基因的质粒。
6.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述转染为阳离子脂质体介导的转染。
7.VIPERIN功能缺失的DF-1细胞系，其特征在于，所述DF-1细胞系表达突变型VIPERIN，所述突变型VIPERIN的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
8.根据权利要求7所述的DF-1细胞系，其特征在于，所述DF-1细胞系含有编码所述突变型VIPERIN的核苷酸。
9.根据权利要求8所述的DF-1细胞系，其特征在于，所述核苷酸的编码区序列如SEQIDNO.4所示。
10.权利要求7～9任一项所述的DF-1细胞系在VIPERIN的分子生物学功能研究、VIPERIN抗病毒机制研究、和/或抗病毒药方面研发中的应用。
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