[发明专利]一种测定血浆中(Z)-阿枯米定碱浓度的方法在审
申请号: | 202010756761.5 | 申请日: | 2020-07-31 |
公开(公告)号: | CN111929383A | 公开(公告)日: | 2020-11-13 |
发明(设计)人: | 蒋志涛;柳春娣;韩怡;李杰 | 申请(专利权)人: | 张家港市中医医院 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86 |
代理公司: | 苏州市方略专利代理事务所(普通合伙) 32267 | 代理人: | 朱智杰 |
地址: | 215600 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 测定 血浆 阿枯米定碱 浓度 方法 | ||
1.一种测定血浆中(Z)-阿枯米定碱浓度的方法,其特征在于,血浆样品经预处理后经液质联用系统检测其浓度,具体方法包括如下步骤:
(1)血浆样品预处理:取血浆样品,加入内标替硝唑甲醇溶液,加入甲醇或乙腈进行蛋白沉淀,离心后取上清液;
(2)将步骤(1)预处理后的血浆样品进行液相色谱分离:色谱条件中色谱柱为AgilentZORBAX SB-C18柱;流动相:体积比为85:15的乙腈与0.1%甲酸水溶液;流速:0.2-0.5 mL•min-1;柱温:30-40 ℃;进样量:5 μL;洗脱方式为等度洗脱;
(3)质谱测定,条件为:离子源:电喷雾离子化电离源ESI;离子检测方式:多反应监测MRM;离子极性:正离子;离子源电压:4500 V;离子源温度:400 ℃;气帘气Curtain gas:20psi;离子源Gas 1:50 psi;离子源Gas 2:60 psi;CXP:9 V;EP:10 V;脱溶剂气和锥孔气均为高纯氮气;检测对象的离子通道:(Z)-阿枯米定碱,[M-H]+,m/z 353.3→166.1,Dwell150,DP 100,Collision Energy 40;内标替硝唑,[M-H]+,m/z 248.1→121.2,Dwell 150,DP 80,Collision Energy 20;
(4)计算:采用内标法,以(Z)-阿枯米定碱和内标替硝唑的峰面积比值代入标准曲线方程计算(Z)-阿枯米定碱的浓度。
2.根据权利要求1所述的测定血浆中(Z)-阿枯米定碱浓度的方法,其特征在于,步骤(1)中,取血浆样品50 μL,加入内标50 ng•mL-1替硝唑甲醇溶液10 μL和200 μL甲醇或乙腈,振荡3 min,12000 rpm离心10 min,离心后取上清液。
3.根据权利要求1所述的测定血浆中(Z)-阿枯米定碱浓度的方法,其特征在于,步骤(2)中,色谱柱长度为100 mm,内径为3.0 mm,填料粒径为3.5 m。
4.根据权利要求1所述的测定血浆中(Z)-阿枯米定碱浓度的方法,其特征在于,所述的血浆为给予了含(Z)-阿枯米定碱药物的血浆。
5.根据权利要求1所述的测定血浆中(Z)-阿枯米定碱浓度的方法,其特征在于,所述血浆为人或动物的血浆。
6.根据权利要求1所述的测定血浆中(Z)-阿枯米定碱浓度的方法,其特征在于,所述血浆为大鼠血浆。
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