[发明专利]一种生产腐胺的工程菌及方法有效
申请号: | 202010757654.4 | 申请日: | 2020-07-31 |
公开(公告)号: | CN114058608B | 公开(公告)日: | 2023-08-25 |
发明(设计)人: | 蔡宇杰;惠红杰;梁鑫鑫;丁彦蕊;白亚军;郑晓晖 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88;C12N9/78;C12N15/60;C12N15/55;C12N1/21;C12P13/00;C12R1/19 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 彭素琴 |
地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生产 工程 方法 | ||
1.与腐胺合成相关的酶的突变体,其特征在于,所述酶为精氨酸脱羧酶和胍基丁胺脲水解酶;
精氨酸脱羧酶的突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示;
胍基丁胺脲水解酶的突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
2. 一种基因工程菌,其特征在于,以大肠杆菌为宿主,表达核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的精氨酸脱羧酶和核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的胍基丁胺脲水解酶基因。
3.根据权利要求2所述的工程菌,其特征在于,以pACYCDuet、pRSFDuet、pCDFDuet或pCOLADuet为表达载体。
4.一种酶转化生产腐胺的方法,其特征在于,利用权利要求1所述突变体转化精氨酸,生成腐胺。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,在40~50℃下反应70~75小时。
6.一种生产腐胺的方法,其特征在于,以精氨酸为底物,利用权利要求2或3所述的基因工程菌全细胞转化生产腐胺。
7. 根据权利要求6所述的方法,其特征在于,精氨酸的浓度不低于300 g/L。
8. 根据权利要求6所述的方法,其特征在于,反应条件为pH 9.0~10.0、40~50℃、100~200 rpm,反应20~30 h。
9.权利要求1所述突变体,或权利要求2~3任一所述基因工程菌,或权利要求4~8任一所述方法在生产腐胺或者含有腐胺的产品或者以腐胺为前体的物质中的应用。
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