[发明专利]一种有效检测泪蛋白降解的方法

说明书

本发明公开了一种有效检测泪蛋白降解的方法，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳检测方法检测角膜接触镜清洗溶液中的蛋白含量，获得表征蛋白降解量的蛋白条带，其具体包括：将被检测蛋白样本加入镜片洗护液中形成混合溶液，控制该混合溶液中被检测蛋白的理论浓度，自该混合溶液中定量取样液进行电泳解离，电泳解离完成后定量取所述样液的上样，并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳检测所述上样中的蛋白上样量，获得表征蛋白降解量的蛋白条带，自所述蛋白条带读取蛋白上样量。通过本发明所述的有效检测泪蛋白降解的方法可以定量定性的检测出镜片泪蛋白的降解情况，证明镜片清洗设备的去蛋白能力，为用户提供实验检测数据，保障用户消费使用安全。

技术领域

本发明涉及生物蛋白检测领域，尤其涉及一种有效检测角膜接触镜上泪蛋白是否完全降解的方法。

背景技术

角膜接触镜如何除蛋白的问题困扰了行业半个多世纪，引发了各国的眼视光行业对接触镜佩戴安全的高度重视。我国也因角膜接触镜上的角膜感染案例频发，从而将接触镜在2012年便列入第三类医疗器械类，作为高风险管理，其原因在于：接触镜材质结构有大量肉眼不见的纤维透痒孔，人眼时刻分泌大量的泪液，泪液里含有大量泪蛋白，泪蛋白极易渗透到纤维透痒孔中，造成镜片DK值降低(透氧率)，造成角膜缺氧、水肿等症状，严重的会造成角膜受损，细菌感染，角膜炎症甚至是视力受损等问题。

为了有效清除接触镜表面的泪蛋白，保障消费者的眼部安全，市场也推出了多种用于去除角膜接触镜表面泪蛋白的方法，但由于肉眼不可见泪蛋白是否被完全有效的洗脱降解，逐渐的蛋白检测方法就被重视发展起来，以使得通过科学检测有效验证是否蛋白被完全降解，但是现阶段市场上的角膜接触镜有效除蛋白的检测方法具有局限性，无法精准定量定性测得接触镜清洗后的蛋白残留，因此其检测结果不全面，仅具有一定的参考意义，其并不能成为定量定性检测蛋白降解程度的专业检测依据。

因此，亟需提出一种新的技术方案来解决上述问题。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术中存在的问题，提供一种有效检测角膜接触镜上泪蛋白是否完全降解的方法，采用的技术方案如下：

一种有效检测泪蛋白降解的方法，其具体包括：

将被检测蛋白样本加入镜片洗护液中形成混合溶液，控制该混合溶液中被检测蛋白的理论浓度，自该混合溶液中定量取样液进行电泳解离，电泳解离完成后定量取所述样液的上样，并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳检测所述上样中的蛋白上样量，获得表征蛋白降解量的蛋白条带，自所述蛋白条带读取蛋白上样量。

在一个进一步的实施例中，所述有效检测蛋白降解的方法具体包括：

提供被检测蛋白样本；

将所述被检测蛋白样本加入A镜片洗护液中形成混合溶液，溶液中被检测蛋白的理论浓度为3mg/mL，取3微升上样进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，获得蛋白条带，自所述蛋白条带读取蛋白上样量为9μg；

进一步的，将所述被检测蛋白样本加入A镜片洗护液中形成混合溶液，溶液中被检测蛋白的理论浓度为0.6mg/mL，自该溶液中取2毫升样液进行电泳解离，30分钟后取15微升上样进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，获得蛋白条带，自所述蛋白条带读取蛋白上样量为9μg；

进一步的，将所述被检测蛋白样本加入B镜片洗护液中形成混合溶液，溶液中被检测蛋白的理论浓度为0.6mg/mL，自该溶液中取2毫升样液进行电泳解离，30分钟后取15微升上样进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，获得蛋白条带，自所述蛋白条带读取蛋白上样量为9μg。

进一步的，所述被检测蛋白样本为溶菌酶，所述溶菌酶的分子量为 14Kda，

进一步的，所述A镜片洗护液为0.9％NaCl溶液，

进一步的，所述B镜片洗护液为含0.9％NaCl的3N专用清洁液，