[发明专利]SAMD9突变型蛋白、Vero细胞系及其构建方法和应用有效

专利信息
申请号: 202010770180.7 申请日: 2020-08-03
公开(公告)号: CN111848772B 公开(公告)日: 2022-03-18
发明(设计)人: 唐娜;沈志强;张倩;苑文娴;管宇;肖跃强;苗立中 申请(专利权)人: 山东绿都生物科技有限公司;山东省滨州畜牧兽医研究院
主分类号: C07K14/47 分类号: C07K14/47;C12N15/12;C12N5/10;C12N15/90;A61K39/275;A61P31/20;C12R1/91
代理公司: 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 代理人: 王艳
地址: 256600 *** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: samd9 突变型 蛋白 vero 细胞系 及其 构建 方法 应用
【权利要求书】:

1.SAMD9突变型蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

2.编码权利要求1所述的突变型蛋白的SAMD9突变型基因。

3.根据权利要求2所述的SAMD9突变型基因,其特征在于,所述SAMD9突变型基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

4.SAMD9突变型蛋白的Vero细胞系,其含有权利要求2或3所述的突变型基因。

5.权利要求4所述的SAMD9突变型蛋白的Vero细胞系的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:通过扩增测序获取了Vero细胞SAMD9基因序列,在其AlbA_2结构域两侧设计基因敲除sgRNA,采用CRISPR/Cas9基因编辑技术,对Vero细胞SAMD9基因的AlbA_2结构域实施基因敲除,经过克隆筛选纯化获得SAMD9突变型Vero细胞,命名为VeroSAMD9。

6.根据权利要求5所述的SAMD9突变型蛋白的Vero细胞系的制备方法,其特征在于,所述sgRNA序列如SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4所示。

7.根据权利要求5所述的SAMD9突变型蛋白的Vero细胞系的制备方法,其特征在于,所述克隆筛选中采用的PCR引物序列如SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8所示。

8.权利要求1所述的SAMD9突变型蛋白、权利要求2或3所述的突变型基因、权利要求5所述的细胞系在制备山羊痘病毒疫苗中的应用。

9.一种山羊痘病毒疫苗,其特征在于,所述疫苗包括权利要求1所述的SAMD9突变型蛋白。

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