[发明专利]一种用于新型冠状病毒检测试剂盒的质控品及其制备方法

权利要求书

1.一种鸡传染性支气管病毒毒株在制备用于新型冠状病毒检测试剂盒的内标质控品的应用，其特征在于，该试剂盒选用鸡传染性支气管病毒QXL87株作为新型冠状病毒检测试剂盒质控标准品：

所述的鸡传染性支气管病毒（Infection bronchitis virus，IBV）为QX型的IBV QXL87株，该毒株已于2018年09月13日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC）；保藏编号： CGMCC No：16381；所述试剂盒质控标准品的制备方法为：

（1）选择鸡传染性支气管炎病毒QXL87株，进行电子显微镜观察，病毒S1基因测定分析；

（2）对鸡传染性支气管炎病毒QXL87株进行传代培养至病毒感染滴度稳定，按照2015版《中华人民共和国兽药典》方法，进行病毒含量测定，作为浓缩纯化以及试剂盒质控标准品质量评价的赋值基点依据；

（3）取病毒感染滴度在10^6.0EID₅₀-10^7.0EID₅₀的病毒液进行3~5倍浓缩，并进行纯化处理；

（4）按照2015版《中华人民共和国兽药典》方法，对毒株进行无菌、支原体、外源病毒的纯净性检验，确定纯净；

（5）用含脱脂奶粉、蔗糖冻干保护液，将浓缩纯化后的目标病毒悬液按 1:1～1:1.5比例进行稀释混匀分装，得到新型冠状病毒检测试剂盒质控标准品；

（6）将得到的质控标准品进行冷冻干燥处理，其中预冻阶段 ：温度为-12～-40℃，时间为1～2h；升华阶段：温度为 -5℃～5℃，真空度为0.04～0.12bar，时间 18～20h ；解析阶段：26～28℃，真空度为0.02～0.04bar最后得到质控标准品的成品。

2.如权利要求1所述的应用，其特征还在于：

（1）针对鸡传染性支气管炎病毒QXL87株，设计特异性的引物及探针，优化检测条件，用于对样品进行荧光定量检测；

（2）将所述质控标准品作为阳性内标质控品，加入到采集的新型冠状病毒患者的咽拭子、鼻拭子、肺泡灌洗液、痰液、血液、血清临床样品进行检测，评价临床样品中是否存在导致检测假阴性抑制物，用于验证新冠病毒核酸检测试剂盒的检测效果。