[发明专利]一种用于新型冠状病毒检测试剂盒的质控品及其制备方法

说明书

本发明涉及一种新型冠状病毒检测试剂盒质控标准品的制备方法。本发明应用新型冠状病毒(SARS‑CoV‑2)同科的鸡传染性支气管炎病毒作为新型冠状病毒核酸检测试剂盒质控标准品。目前新冠检测试剂盒质量层次不齐，且阳性质控均为质粒样品(DNA)，无法对病毒反转录过程进行监督与评估。同时由于临床样品的多样性与复杂性，也造成检测结果的不稳定性。本发明涉及质控品可以在新型冠状病毒检测试剂盒研制、出厂检验及保存期监测过程中提供灵敏度、特异性评价支持，有效监控生产过程中各种因素对于试剂盒质量的影响，同时用于评价样品保存液对病毒的灭活效果，既保证样品中病毒彻底灭活，也保证病毒核酸的有效保存，延长核酸的保存时间，确保检测灵敏度。

技术领域

本发明涉及病毒检测试剂盒质控技术领域，特别涉及新型冠状病毒(2019-nCoV)荧光定量检测试剂盒质控品的制备方法。

背景技术

2019新型冠状病毒(2019-nCoV)被发现，2020年2月11日，国际病毒分类委员会(International Committee on Taxonomy of Viruses,ICTV)正式将新型冠状病毒(2019-nCoV)命名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndromecoronavirus 2， SARS-CoV-2)。人感染了新冠状病毒后常伴有呼吸困难、发热、咳嗽和气促等症状。在较严重病例中，感染可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭，甚至死亡。

针对于当前流行的2019新型冠状病毒研发出快速、准确的检测方法是重要的，荧光定量 RT-qPCR方法通常在1小时内即可完成核酸样本的检测。然而，在试剂盒研发过程中常常会出现假阴性结果。假阴性不但会造成对个体的错误判断，延误病情，更有可能造成传染源的遗漏，造成严重影响。因此，如何最大程度避免检测结果的假阴性出现，选择何种标准品对试剂盒进行质量控制成为迫切需要解决的问题。

研究表明，鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus，IBV)与2019新型冠状病毒同属于冠状病毒科成员，其基因组均为线性的单股正链RNA病毒，5’末端具有甲基化的帽子结构，3’末端具有poly A尾。冠状病毒基因组全长在27～32kb之间，病毒基因组包含6～12 个开放阅读框，在所有冠状病毒基因组中，编码复制酶多聚蛋白以及4种结构蛋白的基因排列次序均相同，即5′-ORF1ab-S-E-M-N-3′，编码辅助蛋白的基因散落在结构蛋白基因之间。鸡传染性支气管炎病毒与2019新型冠状病毒的理化特性几乎相同，研究表明两者均对温度、pH值敏感。同时，对70％乙醇、甲醛、乙醚、氯仿等有机溶剂和消毒剂也均敏感(表1)。表明鸡传染性支气管炎病毒为2019新型冠状病毒荧光定量试剂盒研发过程中理想的标准物质。可有效控制检测试剂盒的特异性、灵敏性、精密性和稳定性等。

表1鸡传染性支气管炎病毒与2019新型冠状病毒的生物学特性比较

发明内容

本发明的目的在于提供一种2019新型冠状病毒(2019-nCoV)检测试剂盒质控标准品的制备方法。

本发明技术方案：

1.本发明所述一种用于新型冠状病毒检测试剂盒的质控品，其特征在于，该试剂盒选用鸡传染性支气管病毒(QXL87株)作为新型冠状病毒检测试剂盒质控标准品：

所述的鸡传染性支气管病毒(Infection bronchitis virus，IBV)为为QX型的IBVQXL87 株，该毒株已于2018年09月13日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)；保藏编号：CGMCC No：16381。

2.本发明所述一种用于新型冠状病毒检测试剂盒的质控品，其特征在于该试剂盒质控标准品的制备方法为：