[发明专利]一种麦胚凝集素修饰白术多糖脂质体及其制备方法有效
申请号: | 202010773319.3 | 申请日: | 2020-08-04 |
公开(公告)号: | CN112056559B | 公开(公告)日: | 2023-03-31 |
发明(设计)人: | 杨鸿;徐志高;罗颖;康天灏;张先东;梁浩钊;邓桦 | 申请(专利权)人: | 佛山科学技术学院 |
主分类号: | A61K47/62 | 分类号: | A61K47/62;A61K47/24;A23L33/115;A23L33/125;A61K9/127;A61K31/715;A61K47/42;A61K47/54;A61K47/69 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 朱继超 |
地址: | 528000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 凝集素 修饰 白术 多糖 脂质体 及其 制备 方法 | ||
1.一种麦胚凝集素修饰白术多糖脂质体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)取PE溶于氯仿中,加入戊二酸酐、吡啶后于室温反应,反应液过硅胶柱,用氯仿-甲醇混合液洗脱,通过旋蒸收集并干燥中间产物N-glut-PE;所述氯仿-甲醇混合液的质量比为9:1;所述氯仿-甲醇混合液的洗脱流速为1 mL/min;产物的TLC检测与PE对照品比较,使用质量比4:1的氯仿-甲醇混合液作为展开剂,碘蒸气、0.2%水合茚三酮溶液分别显色;
2)向制得的N-glut-PE加入DMSO 和NaCl溶液,超声处理后用HCl调至pH 3.5,加入EDCI、WGA反应,得WGA-PE;添加的所述WGA制备成40mg/ml的Tris-HCl溶液;制得的WGA-PE经过分离纯化,所述分离纯化的步骤包括:过硅胶柱,用质量比为4:1:1的丁醇-乙酸-水混合液洗脱,然后以流动水透析,再用PBS缓冲液透析,收集透析内液即为WGA-PE纯品;产物的TLC检测与WGA及N-glut-PE对照品比较,使用质量比4:1:1的丁醇-乙酸-水的混合液作为展开剂,碘蒸气显色;
3)取白术多糖脂质体混悬液加入WGA-PE的PBS溶液,在0~4℃的温度下孵化至少3h,即得;
所述白术多糖脂质体由以下步骤制得:
a)按质量比12:1:8称取磷脂、胆固醇、白术多糖溶于适量乙醇中作为油相;
b)用注射器吸取适量油相,缓慢匀速地注入到PBS缓冲溶液的液面下;
c)将注有油相的PBS缓冲溶液在60℃下以每分钟700转的速度搅拌,持续至有机溶剂挥发后,即得白术多糖脂质体;
步骤1)和步骤2)的产物分别经过TLC检测。
2.一种麦胚凝集素修饰白术多糖脂质体,其特征在于,由权利要求1所述制备方法制得。
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