[发明专利]一种麦胚凝集素修饰白术多糖脂质体及其制备方法

说明书

本发明公开了一种麦胚凝集素修饰白术多糖脂质体的制备方法，包括以下步骤：1)制备N‑glut‑PE；2)以N‑glut‑PE为原料制备WGA‑PE；3)以WGA‑PE和白术多糖脂质体制备麦胚凝集素修饰白术多糖脂质体。亲水性的麦胚凝集素不能直接与脂质体相互作用产生结合，选用带有正电荷的PE与WGA偶联，结合带有较多负电荷的脂质体，有利于通过电性作用及疏水键作用将WGA掺人脂质体双分子层，提高脂质体的定位靶向性质，促进修饰后的白术多糖脂质体的肠道吸收。

技术领域

本发明涉及食品或食料处理技术领域，特别涉及一种麦胚凝集素修饰白术多糖脂质体，以及制备该白术多糖脂质体的方法。

背景技术

植物多糖是由许多相同或不同的单糖以α一或β一糖苷键所组成的化合物，普遍存在于自然界植物体中，包括淀粉、纤维素、多聚糖、果胶等。由于植物多糖的来源广泛，不同种的植物多糖的分子构成及分子量各不相同。有些植物多糖如淀粉、纤维素、果胶，早已成为人们日常生活中的重要组成部分。

脂质体(Liposomes)是由卵磷脂和神经酰胺等制得的脂质体(空心)，具有的双分子层结构与皮肤细胞膜结构相同，对皮肤有优良的保湿作用，尤其是包敷了保湿物质如透明质酸、聚葡糖苷等的脂质体是更优秀的保湿性物质。

发明内容

本发明针对上述问题，提供一种麦胚凝集素修饰白术多糖脂质体的制备方法，以解决现有技术中所存在的一个或多个技术问题，至少提供一种有益的选择或创造条件。

一种麦胚凝集素修饰白术多糖脂质体的制备方法，包括以下步骤：

1)取PE(磷脂酰乙醇胺)溶于氯仿中，加入戊二酸酐、吡啶后于室温反应，反应液过硅胶柱(1.0cm×25cm)，用氯仿-甲醇混合液洗脱，收集并干燥中间产物N-glut-PE；

2)向制得的N-glut-PE加入DMSO(二甲基亚砜)和NaCl溶液，超声处理后用HCl调至pH 3.5，加入EDCI(1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐)、WGA(麦胚凝集素)反应，得WGA-PE；

3)取白术多糖脂质体混悬液加入WGA-PE的PBS溶液，孵化即得。

进一步，步骤1)用于洗脱的氯仿-甲醇混合液的质量比为9:1，洗脱流速为1ml/min。经氯仿-甲醇混合液洗脱后通过旋蒸干燥获得中间产物N-glut-PE。

进一步，步骤2)所添加的WGA是将WGA溶于Tris-HCl制备成40mg/ml的溶液。

进一步，步骤2)制得的WGA-PE经过分离纯化，所述分离纯化的步骤包括：过硅胶柱(1.0cm×25cm)，用质量比为4:1:1的丁醇-乙酸-水混合液洗脱，然后以流动水透析，再用PBS缓冲液透析，收集透析内液即为WGA-PE纯品。

其中，步骤1)和步骤2)的产物分别经过TLC检测。步骤1)产物的TLC检测与PE对照品比较，使用质量比4:1的氯仿-甲醇混合液作为展开剂，碘蒸气、0.2％水合茚三酮溶液分别显色。步骤2)产物的TLC检测与WGA及N-glut-PE对照品比较，使用质量比4:1:1的丁醇-乙酸-水的混合液作为展开剂，碘蒸气显色。

进一步，步骤3)所述孵化是在0～4℃的温度下孵化至少3h。步骤3)所使用的白术多糖脂质体由以下步骤制得：

a)按质量比12:1:8称取磷脂、胆固醇、白术多糖溶于适量乙醇中作为油相；

b)用注射器吸取适量油相，缓慢匀速地注入到PBS缓冲溶液的液面下；

c)将注有油相的PBS缓冲溶液在60℃下以每分钟700转的速度搅拌，持续至有机溶剂挥发后，即得白术多糖脂质体。

本发明与现有技术相比具有优点：