[发明专利]SVF细胞以及制备方法与应用有效
申请号: | 202010774237.0 | 申请日: | 2020-08-04 |
公开(公告)号: | CN111849886B | 公开(公告)日: | 2023-03-17 |
发明(设计)人: | 董健伸;徐汝强;孙永沛;程洪斌;王晓东;徐俊;顾非凡;高振宇 | 申请(专利权)人: | 北京博品贝莱生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;C12N5/077;A61K35/28;A61K35/34;A61P19/02;A61P29/00;A61P19/08 |
代理公司: | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人: | 孙周强 |
地址: | 101199 北京市通州区榆*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | svf 细胞 以及 制备 方法 应用 | ||
1.SVF细胞,其特征在于,SVF细胞的提取方法包括以下步骤,将胶原酶Ⅰ、胶原酶Ⅱ、胶原酶Ⅳ、透明质酸加入生理盐水中制备得到SVF提取试剂,SVF提取试剂中,胶原酶Ⅰ的质量浓度为0.1%;胶原酶Ⅱ的质量浓度为0.2%;胶原酶Ⅳ的质量浓度为0.05%;透明质酸的浓度为1g/L;将脂肪组织加入PBS中洗涤,静置分层后,吸除下层洗涤液,再洗涤至洗涤液无色,吸除下层洗涤液,得到洗涤后的脂肪;将洗涤后的脂肪加入离心管中,再加入等体积的SVF提取试剂,于37℃以80rpm振荡消化1小时,得到消化液;将消化液500g离心5分钟,然后去除上层脂质,剩余部分加入5倍体积的生理盐水,然后以80μm滤膜过滤,滤饼加入生理盐水中,然后300g离心3分钟,去除上清液,得到SVF细胞。
2.权利要求1所述SVF细胞在制备药物中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述药物包括关节炎药物、软骨损伤药物、美容药物。
4.SVF细胞的制备方法,其特征在于,包括以下步骤,将胶原酶Ⅰ、胶原酶Ⅱ、胶原酶Ⅳ、透明质酸加入生理盐水中制备得到SVF提取试剂,SVF提取试剂中,胶原酶Ⅰ的质量浓度为0.1%;胶原酶Ⅱ的质量浓度为0.2%;胶原酶Ⅳ的质量浓度为0.05%;透明质酸的浓度为1g/L;将脂肪组织加入PBS中洗涤,静置分层后,吸除下层洗涤液,再洗涤至洗涤液无色,吸除下层洗涤液,得到洗涤后的脂肪;将洗涤后的脂肪加入离心管中,再加入等体积的SVF提取试剂,于37℃以80rpm振荡消化1小时,得到消化液;将消化液500g离心5分钟,然后去除上层脂质,剩余部分加入5倍体积的生理盐水,然后以80μm滤膜过滤,滤饼加入生理盐水中,然后300g离心3分钟,去除上清液,得到SVF细胞。
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