[发明专利]连续旋蒸脱溶双酶解制备牦牛皮小分子胶原蛋白肽的方法有效
申请号: | 202010775142.0 | 申请日: | 2020-07-31 |
公开(公告)号: | CN111944866B | 公开(公告)日: | 2023-06-20 |
发明(设计)人: | 黄彪;雷绍南;马青林 | 申请(专利权)人: | 青海瑞肽生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/18;C07K1/14;C07K1/34;C07K1/36;C07K14/78 |
代理公司: | 长沙新裕知识产权代理有限公司 43210 | 代理人: | 吴越 |
地址: | 817000 青海省海西蒙古族藏族自治州德令哈市*** | 国省代码: | 青海;63 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 连续 旋蒸脱溶双酶解 制备 牦牛 分子 胶原 蛋白 方法 | ||
本发明公开了一种连续旋蒸脱溶双酶解制备牦牛皮小分子胶原蛋白肽的方法,包括(1)牦牛皮前处理,(2)匀浆,(3)酶解,(4)离心分离,(5)脱色、脱腥、脱盐,(6)浓缩干燥步骤,其特征在于所述步骤(3)酶解包括:第一次酶解,超微细化处理,第二次酶解。本发明通过双酶解与连续旋蒸脱溶结合,可大幅缩短酶解时间,提高工艺效率,且制备的牦牛皮胶原蛋白肽纯度高,无色无味,分子量小,有利于人体直接吸收。
技术领域
本发明属于胶原蛋白肽提取技术领域,具体涉及一种连续旋蒸脱溶双酶解制备牦牛皮小分子胶原蛋白肽的方法。
背景技术
青海是全国最大的牦牛生产基地,占全国牦牛总数的三分之一以上,盛传为“世界牦牛之都”。独有的高原环境,使牦牛拥有极强的免疫力,强力的紫外线照射,使牦牛成为无菌资源的宝库,天然的放养方式,使牦牛具有独特的营养价值和可靠的安全性。因此,“世界屋脊”之称的牦牛是提取胶原蛋白肽的优良原料,进一步的加大牦牛皮的利用价值,减轻屠宰“废弃物”的问题。
现有的皮类提取原料中,仍是以深海鱼类为主,通过深海鱼皮所制备的胶原蛋白肽一直为市场上的主流,尤其是进口深海鳕鱼皮胶原蛋白肽深受大众欢迎。当前市场上的牛皮胶原蛋白肽,相比于鱼皮胶原蛋白肽,大多数产品色泽偏黄,有牛皮淡腥味,对食用口感有一定影响,作为添加原料同样影响终端产品的品质。由于本身陆地脊椎动物制备胶原蛋白肽产率低于海洋动物,同时酶解的过程中产生大量未水解碎屑增加过滤负担,生产有利于人体吸收的小分子肽成本颇高,以至于生产牛皮胶原蛋白肽的很多地方没有得到改善。因此,有必要开发一种更绿色环保,低成本,高品质的牛皮胶原蛋白肽的高效提取方法,增强我国青海牦牛皮的利用价值和牛皮肽的市场地位。
发明内容
为解决上述内容中的不足,本发明的目的在于提供一种连续旋蒸脱溶双酶解制备牦牛皮小分子胶原蛋白肽的方法,本发明通过双酶解与连续旋蒸脱溶结合,可大幅缩短酶解时间,提高工艺效率,且制备的牦牛皮胶原蛋白肽纯度高,无色无味,分子量小,有利于人体直接吸收。
本发明的技术方案如下。
连续旋蒸脱溶双酶解制备牦牛皮小分子胶原蛋白肽的方法,包括(1)牦牛皮前处理,(2)匀浆,(3)酶解,(4)离心分离,(5)脱色、脱腥、脱盐,(6)浓缩干燥步骤,其特征在于所述步骤(3)酶解包括:
第一次酶解:于步骤(2)匀浆得到的牦牛皮浆液中加入胃蛋白酶,之后于真空度0.85~0.98MPa、转速15~60r/min、温度35~40℃下进行旋蒸脱溶酶解4~6h,得第一次酶解液;
超微细化处理:将第一次酶解液灭酶,之后过200目筛,之后收集筛下液采用纳米对撞机进行超微细化处理,使处理后的筛下液的平均粒径小于500nm,得纳米化酶解液;
第二次酶解:调整纳米化酶解液的pH至合适范围,加入碱性蛋白酶与丝氨酸蛋白酶的复合酶液,之后于真空度0.85~0.98MPa、转速15~60r/min、温度45~55℃下进行旋蒸脱溶酶解2~3h;所述丝氨酸蛋白酶为胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、弹性蛋白酶中的任意一种;
上述步骤中,通过在酶解时进行旋转真空脱溶,可以维持酶解过程的底物浓度在较高水平,有利于提高整体的酶解速率,从而大幅缩短酶解时间;另外,将酶解液利用纳米对撞机进行处理,可以使含有胶原蛋白的酶解液的平均粒径达纳米级,可增加酶与底物的结合位点,提高酶解速率。
作为优选技术方案,所述步骤(3)中第一次酶解、第二次酶解进行旋蒸脱溶酶解时,同时施加超声波。
作为具体技术方案,所述步骤(1)牦牛皮前处理具体为:称取新鲜牦牛皮,脱毛后切碎,于室温下按料液质量比为1:3~7kg/kg加入质量浓度为3%~5%的纯碱浸泡6~8h,浸泡结束后清水洗净牦牛皮至中性,之后将牦牛皮按料液质量比为1:3~7kg/kg加入至质量浓度为3%~5%食盐中再次浸泡6~8h,浸泡结束后,清水洗净牦牛皮呈中性。
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