[发明专利]β-葡聚糖的制备工艺

说明书

本发明公开了一种β‑葡聚糖的制备工艺，先进行菌种筛选，准备若干株菌种，并利用刚果红琼脂染色法对其定性检测，检测各个菌种的β‑1,3‑葡聚糖酶活，筛选较高酶活的菌种作为待培养菌种。再对菌种进行培养，先通过斜面种子培养7‑8d，再接种至平板培养基进行培养，其中平板培养基各组分包括葡萄糖28‑30g/L、磷酸二氢钾1‑2g/L、酵母浸膏6‑10g/L、琼脂18‑20g/L、硫酸镁1‑2g/L、氯化铵2‑3g/L。本申请公开了一种β‑葡聚糖的制备工艺，工艺设计合理，操作简单，本申请通过对裂褶菌发酵、分离提纯，并优化改进各个参数步骤，制备得到β‑葡聚糖，该产物水溶性好、生物活性高，且产品的粗糖得率、保留率和纯度较高，可应用于大规模生产，成本低，具有较高的实用性。

技术领域

本发明涉及β-葡聚糖制备技术领域，具体是一种β-葡聚糖的制备工艺。

背景技术

葡聚糖，指以葡萄糖为单糖组成的同型多糖，葡萄糖单元之间以糖苷键连接，其中根据糖苷键的类型又可分为alpha-葡聚糖和beta-葡聚糖。

beta-葡聚糖(β-葡聚糖)活性结构是由葡萄糖单位组成的多聚糖，它们大多数通过β-1,3结合，这是葡萄糖链连接的方式。它能够活化巨噬细胞、嗜中性白血球等，因此能提高白细胞素、细胞分裂素和特殊抗体的含量，全面刺激机体的免疫系统；同时β-葡聚糖还具有清除游离基、抗辐射、溶解胆固醇，预防高脂血症等作用，可广泛用于医药、食品、化妆品等领域。

现如今，β-葡聚糖的生产已经步入规模化，但现有的生产工艺制备得到成品的纯度较低，生产过程中脱色、脱蛋白步骤损耗较大，使用效果差。

针对该问题，我们提供一种β-葡聚糖的制备工艺，以解决该问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种β-葡聚糖的制备工艺，以解决现有技术中的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种β-葡聚糖的制备工艺，包括以下步骤：

1)菌种筛选；

2)菌种培养；

3)发酵；

4)粗提脱色；

5)脱蛋白；

6)得到β-葡聚糖成品。

较优化的方案，包括以下步骤：

1)菌种筛选，得到待培养菌种；

2)菌种培养；取待培养菌种，斜面种子培养7-8d，培养温度为26-28℃，再接种于平板培养基中，25-30℃下培养7-8d，得到种子液；

3)发酵：取种子液，置于发酵罐中发酵7-8d，得到发酵液；

4)粗提脱色：发酵液进行γ射线辐照，辐照后静置，接着进行高压均质，离心分离，上清液为β-葡聚糖高压均质粗提液，沉淀部分加水后置于-15℃下冻结3-4h，25-28℃水浴下解冻0.5-1h，重复冻融操作2-3次，进行微波提取，离心分离，收集上清液，与β-葡聚糖高压均质粗提液合并，脱盐浓缩，再加入大孔树脂，摇床中处理9-10h，转速为120-150r/min，处理温度为20-28℃，得到脱色液；

5)脱蛋白：取脱色液，加入聚酰胺粉末，25-28℃下振荡2-2.5h，抽滤，离心，取上清，加入乙醇醇析，析出物干燥，得到β-葡聚糖成品。

较优化的方案，包括以下步骤：

1)菌种筛选：准备菌种，分别进行刚果红琼脂染色法定性测试，检测菌种的β-1,3-葡聚糖酶活，进行筛选，得到待培养菌种，备用；