[发明专利]噻螨酮半抗原及其制备方法、噻螨酮抗原、抗体及其应用

说明书

本发明提供了一种噻螨酮半抗原，以及制备该噻螨酮半抗原的方法，同时还提供了相应的噻螨酮抗原和噻螨酮抗体，此外还将其应用于免疫学检测中，并且由此提出了噻螨酮胶体金层析检测装置和检测样品中噻螨酮的方法。本发明提供的噻螨酮半抗原最大程度地保留了噻螨酮的特征结构，增强了噻螨酮半抗原的免疫性，并且通过进行适当的化学修饰引入了与载体蛋白偶联的活性基团‑羧基，为后续建立噻螨酮的各种免疫分析方法提供基础。本发明提供的噻螨酮半抗原的制备方法，使用的化学试剂容易得到、操作过程简单、反应产率较高、并且检测成本较低。本发明提供的免疫学检测方法具有灵敏度高、特异性强、成本低、操作简单、检测时间短、保质期长等优点。

技术领域

本发明涉及食品安全检测领域。更具体地，本发明涉及一种噻螨酮半抗原及其制备方法、噻螨酮抗原、噻螨酮抗体以及上述半抗原、抗原和抗体在免疫学检测中的应用。

背景技术

噻螨酮(Hexythiazos)，属于噻唑烷酮类杀螨剂。噻螨酮对多种植物害螨具有强烈的杀卵、杀幼若螨的特性，对成螨无效，但对接触到药液的雌成虫所产的卵具有抑制孵化的作用。噻螨酮以触杀作用为主，对植物组织有良好的渗透性，无内吸作用，对作物、哺食螨和益虫安全。此外，经动物急性毒性试验发现，大鼠急性经口LD505000mg/kg，大鼠急性经皮LD505000mg/kg，低毒，因此可取代对哺乳动物毒性高、有残留和环境问题的有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯和有机氯杀虫剂。

我国规定噻螨酮在梨果中最高残留限量值(MRL)为0.5mg/kg。欧盟规定噻螨酮在茶中的残留限量值(MRL)为4mg/kg。目前，噻螨酮的检验方法有高效液相色谱法(LC)、气质联用法(GC/MS)、气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)、液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)，上述检测方法具有精度高、分离效率高、选择性好、假阳性率低、重现性好等优点，但操作复杂、设备昂贵，对操作人员技术要求高，且不能立即显示结果等问题，不适用于快速的在线检测和监控。

免疫学检测分析方法是一种以抗原抗体的特异性识别、可逆性结合反应为基础的分析方法，具有灵敏度高、特异性高，对仪器的要求不高、快速、操作简便、成本低等优点，目前被广泛地用于食品等中的有害物质的检测中。然而，建立免疫学检测分析技术并将其应用于检测噻螨酮农药残留量的关键技术在于能够获取到特异性强、灵敏度高的抗体，而要实现这一目标，前提条件就是设计并合成出合适的噻螨酮半抗原。但是，目前尚未有关于噻螨酮半抗原合成的相关报道。

因此，本领域亟需设计和开发出一种合适的噻螨酮半抗原，藉此来实现通过免疫学检测分析方法来检测噻螨酮农药残留。

发明内容

有鉴于此，本发明设计并合成了一种噻螨酮半抗原、由此提供了相应的抗原、抗体、及其免疫学检测中的应用，以及包括上述抗原和抗体的免疫学检测装置。

根据本发明的第一方面，本发明提供了一种噻螨酮半抗原，所述噻螨酮半抗原的结构式如式(I)所示：

其中n为1、2或3。

根据本发明的第二方面，本发明提供了制备本发明的第一方面所述的噻螨酮半抗原的方法，所述方法包括如下步骤：

1)在碱性条件下，使4-羟基苯丙酮与卤代C3-C5烯烃反应，得到中间体1；优选地，将4-羟基苯丙酮与卤代C3-C5烯烃溶解在二甲基甲酰胺中，再加入碳酸钾，并于60-90℃反应，直至反应结束；优选地，4-羟基苯丙酮、卤代C3-C5烯烃、碳酸钾的摩尔比为1:(1-2)：(1-5)；所述卤代C3-C5烯烃为3-卤代丙烯、4-卤代丁烯、5-卤代戊烯；

其中n等于1、2或3；

2)使中间体1发生肟化反应，得到中间体2；优选地，使中间体1与盐酸羟胺发生肟化反应，得到中间体2；优选地，中间体1与盐酸羟胺的摩尔比为1:(0.9-3)；