[发明专利]一种用于鉴别暗纹东方鲀、红鳍东方鲀及杂交东方鲀的特异性引物及其方法

权利要求书

1.一种特异性引物鉴别暗纹东方鲀、红鳍东方鲀及杂交东方鲀的方法，其特征在于，包括提取待鉴定的东方鲀基因组DNA、利用特异性引物对东方鲀DNA进行PCR扩增以及PCR产物检测；

所述PCR扩增反应体系为灭菌水7.4μL，2×Taq Plus Mix 10μL，10uM正反特异性引物各0.8μL，DNA1μL；

所述PCR扩增反应程序为95℃预变性5min；40个循环：94℃变性30sec，58℃退火30sec，72℃延伸30sec；最后72℃延伸7min，4℃保存；

PCR产物检测为琼脂糖凝胶电泳检测扩增条带，其中暗纹东方鲀有3条条带，位置分别在150bp、800bp和1500bp左右；红鳍东方鲀有3条条带，位置分别在150bp、1000bp和1800bp左右；杂交东方鲀有5条条带，位置分别处于150bp、800bp、1000bp、1500bp和1800bp左右；

所述用于鉴别暗纹东方鲀、红鳍东方鲀及杂交东方鲀的特异性引物，包括正向引物和反向引物，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1-2所示：

正向引物SEQ ID NO.1：5′-AAAGGGGAGTTTTTCCTTGCCACT-3′；

反向引物SEQ ID NO.2：5′-CCCACATTCTCTCCATCTCCTCCT-3′。