[发明专利]靶向标记叶酸受体亚型手性荧光双标记探针及其制备方法

权利要求书

1.一种靶向标记叶酸受体亚型手性荧光双标记探针，其特征在于：该探针结构包括有手性量子点和叶酸耦合而形成的手性荧光双标记探针，所述探针的末端是叶酸(FA)，所述手性量子点具有手性光学活性，所述探针具有能够靶向识别肿瘤细胞和荧光显像的特性；

其中，所述手性荧光双标记探针的手性量子点结构包括有：L/D-Cys-CdTe结构、L/D-Cys-CdTe/CdS核壳结构、L/D-半胱氨酸/谷胱甘肽/青霉素-Cd(Zn)Te(Se,S)结构和L/D-半胱氨酸/谷胱甘肽/青霉素-(Cd,Zn)(Te,Se,S)/(Cd,Zn)(Te,Se,S)核壳结构。

2.一种根据权利要求1所述靶向标记叶酸受体亚型手性量子点手性荧光双标记探针的制备方法，该方法包括以下步骤：

手性量子点的制备：

1)量取0.01-0.10gTe/Se/S粉与0.01-0.10gNaBH₄并溶解于5ml去离子水中，在惰性气体的保护下，获得前体溶液；

2)量取0.1-0.3g氯化镉/氯化锌(CdCl₂/ZnCl₂)、配体与上述获得的前体溶液相互混合于45ml去离子水中，并且pH值为7-12，其中，所述配体为手性配体；

3)将步骤2)中的混合溶液，在加热并有惰性气体保护条件下反应，反应时间100-150min；

4)CdTe/CdS/CdSe回流2小时后，自然冷却至30℃-80℃，分别配置浓度为0.5mol/L的Na₂S溶液和浓度为0.5mol/L的CdCl₂/ZnCl₂溶液各5ml，超声溶解，待温度降到60℃，分别滴加配置好的Na₂S溶液和CdCl₂/ZnCl₂溶液，滴加完毕后，加热温度至50℃-90℃回流1-3小时即可得到手性量子点溶液；

手性荧光双标记探针的制备(手性量子点与叶酸耦合)：

5)上述溶液再次降温至50-75℃，先后加入250μL浓度为0.01-0.1mol/L DCC和250μL相同浓度的NHS，室温条件下反应0.5-1.5小时；

6)加入250μL 0.01-0.1mol/L的叶酸(FA)溶液，氮气保护下不加热搅拌反应8-24小时，然后在去离子水中透析8-24小时，透析期间换水3-4次，得到纯化后的靶向标记叶酸受体亚型手性荧光双标记探针。

3.根据权利要求2所述的靶向标记叶酸受体亚型手性量子点荧光探针的制备方法，其特征在于：所述手性配体为L-半胱氨酸、D-半胱氨酸、谷胱甘肽、青霉素等手性配体中的一种。

4.根据权利要求2所述的一种靶向标记叶酸受体亚型手性量子点荧光探针的制备方法，其特征在于：所述步骤2)的混合溶液中，Cd/Zn：Te/Se/S：配体的摩尔比为1：(0.1-1)：(0.1-5)，其中，CdCl₂的摩尔浓度为1-10mmol/L。

5.根据权利要求2所述的一种靶向标记叶酸受体亚型手性量子点荧光探针的制备方法，其特征在于：所述步骤3)中加热方式包括水浴法、油浴法和水热法，水浴法的加热温度为80-100℃，油浴法、水热法的加热温度为75-185℃。