[发明专利]一种氨基己酸及其制剂中聚合体的检测方法

说明书

本发明属于化学药物分析技术领域，具体公开了一种氨基己酸及其制剂中聚合体的检测方法，其中以过敏杂质四聚体为主。本发明采用高效分子排阻色谱仪进行检测；所述的色谱条件如下：色谱柱：TSK‑GEL‑G2000SWXL，7.8*300mm，5μm；流动相A：pH值为7.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液；流动相B：乙腈；柱温：25℃；检测器：紫外检测器；检测波长：254nm；进样量：20μL；流速：0.8mL/min；洗脱方式：等度洗脱，流动相A和流动相B的体积比为98:2。本发明可有效将氨基己酸及其四聚体有效分离，有效控制产品的质量，保障整个货架期内的产品质量，降低药物的副作用。

技术领域

本发明属于化学药物分析技术领域，涉及一种氨基己酸及其制剂中聚合体的检测方法，其中以过敏杂质四聚体为主。

背景技术

氨基己酸四聚体(分子式：C₂₄H₄₈N₄O₅)，结构式如下所示：

氨基己酸能阻碍纤维蛋白溶解酶的形成，因而抑制纤维蛋白的溶解而达到止血目的，临床用于预防及治疗纤维蛋白溶解亢进引起的各种出血。氨基己酸注射液临床使用剂量大，每次用量都在克级以上，其质量尤其是杂质的情况应加以控制。由氨基己酸结构来看，氨基己酸的聚合体呈多聚体，主要为四聚体，六聚体次之，未见无聚体。

目前，氨基己酸注射液在中国药典2015版中采用HPLC外标法测定己内酰胺，有关物质则采用薄层色谱法，鉴于氨基己酸易聚合的不稳定特性，而聚合体杂质并没有单独建立分析方法进行控制，很有可能造成聚合物杂质引发的不良反应如过敏症状的安全风险，更有可能的是，普遍使用在有关物质检查项的C18色谱柱系统，也根本无法检出或有效分离出氨基己酸相关的聚合物杂质，给用药的疗效和安全性带来了隐患。

发明内容

发明目的：本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种氨基己酸及其制剂中聚合体的检测方法。

发明思路：发明人运用十八烷基硅烷键合硅胶为填充的C18柱，检测氨基己酸原料药，色谱图中只检出氨基己酸主成分峰，并无其他杂质峰，于是发明人进一步将富含聚合物杂质的母液进行浓缩，将浓缩物通过制备液相的方法进行分离并收集聚合物组分峰，将收集的聚合物杂质浓缩，送检进行ESI-MS的质谱分析，发现有新的质子峰，该质子峰与四聚体一致，即上述杂质浓缩中主要显示的是四聚体的质子峰；说明普通的C18色谱柱并不能分离出氨基己酸四聚体杂质，在高效的分子排阻色谱法条件下分离出的杂质峰即四聚体杂质，所以我们参考β-内酰胺类抗生素控制聚合物杂质的方法，采用高效的分子排阻色谱法，通过该方法，氨基己酸原料药分离出一个杂质峰。

为了解决上述技术问题，本发明公开了一种氨基己酸及其制剂中聚合体的检测方法，采用高效分子排阻色谱仪进行检测。

其中，所述的聚合体为氨基己酸分子间脱水缩合而成的四聚体，结构式如式I所示；

其中，所述的色谱条件如下：

色谱柱：TSK-GEL-G2000SWXL，7.8*300mm，5μm；

流动相A：pH值为7.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液；

流动相B：乙腈；

柱温：25℃；

检测器：紫外检测器；

检测波长：254nm；

进样量：20μL；

流速：0.8mL/min；

洗脱方式：等度洗脱，流动相A和流动相B的体积比为98:2。